非瘟防控：我们应该明白什么？
高登·斯邦克＆约翰·迪恩
从感染到最初的临床征兆是什么时间?（人的问题）
最少: 2天；最多:无限
驱动因素:
-临床技能
-评估频率
-检测特异性和灵敏度
-期望
从感染到第一次去除是什么时间？（生物学问题）
平均: 2天；最少：1天；最多：无限
驱动因素:
-免疫
-剂量
该病毒在环境中生存了多长时间?（取决于剂量）
最少: 3天；最多:无限
驱动因素:
-环境类型
-治疗处理
-物理动力
什么是最佳检测（金标准）样品?
黄金标准的目的:测试其他提议的技术来评估敏感性和特异性，可能是一种测试
-替代方法是贝叶斯法（潜在类模型）
-通常是人为创造
-通常答案是血液PCR
阳性是感染猪,去除猪,还是临床猪?
特异性和敏感性的重要性是什么?
·没有完美的测试,需要管理测试
·灵敏度随特异性下降而上升（经济上最佳）
·可以针对目的精炼和调整测试
·农场的第一头猪还是随后的感染?
·对临床体征敏感性和特异性的检查不足,并受到期望偏差的驱动
生产者可以预料到可能发生错误的地方吗?
·是的,但是需要工作和合作
·创建受监控的图层
·测试风险敞口并分享结果
·持续的数据库和科学
在受控研究设置下需要确认哪些数据?
√猪会去除多少病毒?
体格/年龄、时间、季节
√半存留期是什么?
地板、水、空气、饲料、消毒剂
√前哨动物受感染的可能性
成功的关键
·具有高灵敏度的计划
·受过训练的技术人员
·由专业人员实施
·审查和审核结果
·改进
·重复
通过清洁和消毒促进疾病的消除
克菜顿·约翰逊，兽医学博士
ASF的消除:残酷的事实
√我们还没有成功:
-到8月份为止，只有3-4个被成功清除并重新生产的案例
-另外2个小于60天但看起来有效
√其它一些则取得了成功:
-在欧洲和北美国家的根除
-在欧洲和俄罗斯成功率显著提高
ASF消除失败：根本原因
主要原因:
-试图同时进行清群，处理死猪和清洁农场
-试图尽快补栏——42天的停工时间不够
需要理解的关键点
1、工作量巨大
-初始成功率低
2、我们不能犯任何错误
-我们有足够的劳动力和时间来正确地完成这项工作
3、有很多有效方法来清洁和消毒
-没有一个计划可以适用于每一个农场
-许多计划都可能奏效
4、清洁的物理学
-化学（表面活性剂螯合剂，pH值）
-机械（压力，擦拭，拆除）
-温度（热水）
-时间（泡沫/附着接触时间）
5、消毒的物理学
-化学消毒
-高温消毒
-pH值消毒
-紫外线消毒
都需要与病毒或病菌接触、适当的浓度或水平、接触时间足够
7、常见的消毒误区:
-试图对有机物进行消毒
-没有使用洗涤剂
-在已经潮湿的表面使用消毒剂
-错误的化学消毒剂选择
ASF消除
1、分成两个阶段
阶段1:动物和废物清除
阶段2:设施清洁
2、不要试图快速重新补栏
-至少保持三个月停工
-理想情况下至少四个月
3、考虑季节性-夏季是高风险
-虫媒病毒:昆虫的季节性
-欧盟的爆发评估支持
4、ASF不是一种通过空气传播的疾病
-然而，ASF可以通过高压清洗过程雾化
-洗涤前使用碱性洗涤剂
-避免有风的天气
-监测农场附近的风向
阶段1：ASF污染最小化
1、发现患病动物时隔离
-把病猪转移到统一场所
-减少污染的面积
2、与邻近农场沟通
-消除交叉的交通
-减少区域传播
3、对被感染的猪进行安乐死
-如有可能，在运输或弃置区内进行
-减少血液污染
4、动物尸体风险最小化
-割开肚子（小编不认同这点）
-充分使用农业石灰
-如有可能，焚烧
5、干洗受感染的猪区
-清猪后，使用铲子和扫帚清理饲料、板条上方的粪便、结痂/泥土/灰尘、垃圾等
6、仔细选择掩埋位置，其他受污染的物品一同和感染动物掩埋（泥土、肥料、干洗的所有材料）
-水污染
-对邻近农场的风险
-控制食腐动物
7、继掩埋之后，充分使用农业石灰来覆盖尸体掩埋位置
-掩埋地点
-道路
8、防止接近掩埋位置
-围栏隔离人与动物
-控制啮齿动物
-控制昆虫
9、开始对工人和掩埋设备进行净化
-车辆需要彻底清洁
-工人的衣服和鞋子应该被烧毁
-在所有东西使用石灰（pH），化学消毒剂，温度
-如果它不能被清洗和消毒，它必须被烧毁
阶段2：净化设施
隐形缺陷
在粪中25天
在水中60天
1、隔离清洁工作人员
-已知受污染的房间
-推定无污染房间
2、用水和碱性洗涤剂预浸所有表面
-必须泡沫并附着表面
-清洁是关键步骤（消毒剂减少4-6次方的病毒数）
3、水源（机械冲洗所有水管）
-拿掉饮水嘴进行清洗
-必须在我们消毒之前去除生物膜
-在水管中使用碱性洗涤剂
-洗涤剂冲洗并使用氧化消毒剂
4、粪便
-在第1阶段的排掉粪便
-去除地板板条以便清洗粪池
-为员工提供呼吸装置
-初次洗涤后使用猪舍石灰，混凝土自然碱性!
5、90/10规则
-花费90%的时间用于清洁
-消耗10%的时间消毒
-对ASF还不够
6、温度显著影响洗涤能力
-使用热水高压清洗机
-主管每天检查水温
7、检查每个房间
-主管级别，经过培训和认证
-不由农场经理或员工管理
-轮班检查员，农场最多2周
-审核审核员:检查您的检查员
8、检查后消毒检查通过的房间
-批准的化学消毒剂
-表面“附着”的优异起泡能力
-起泡沫后检查（所有表面都要覆盖，没有例外）
9、使用颜色编码标志指示清洁，检查和通过的房间/猪舍
-使用空中地图表明猪场的清洁，肮脏和工作区域
-每日更新，在自助餐厅和集团微信发布
停工期
1、最少3个月，理想情况下为4个月
-保持低植被
-积极使用啮齿动物诱饵
-控制昆虫
-每月在农场使用农业石灰
-搅动和测试泥浆检测ASF- 60天
2、所有非猪区的清洁和卫生必须是农场的特定计划
-饲料储存
-堆肥
-粪便分离设施
-办公区
-食堂
-宿舍/健身室
-农场进入区
3、保持猪区清洁，保持热和空
-保持房间尽可能热
-使用耐火式加热器并从一个房间移动到另一个房间
-继续淋浴进/出
-清洁，检查和批准过的区域使用新服装和靴子（不同于旧衣服和靴子的颜色）
在装猪之前
1、猪区的最终检查
-使用与初始检查员不同的人
-考虑第三方顾问
-失败的代价是巨大的
2、最后消毒
-热雾消毒
总结
1、我们必须改进清洁和消毒计划，以提高消除成功率
2、使用两阶段方法。第1阶段:尽量减少ASF污染；第2阶段:净化设施
3、重新装猪前的停工时间必须至少增加到3个月
4、检查过程至关重要
5、明确农场的清洁、肮脏和工作区域
6、通过多种方式攻击病毒（pH值、温度、化学消毒剂）
非洲猪瘟疫情下规模化猪场复产及案例
张桂红·华南农业大学
复产流程
复盘，查找原因→彻底销毁、清洗消毒→干燥、烘干→生物安全设施设备升级改造→二次清洗消毒→三次清洗消毒→空栏评估
举例：
某集团一个一体化猪场
2019年1月25日发病，母猪区--清理
保育、育肥正常
2019年春节过后，3月1日，将母猪区母猪
料饲喂给育肥舍3栋，12天后，3栋育肥舍
弥散式发病
饲料?
料线和水线
料线：
·拆卸所有料线，若工程量大，建议更换；
·放置3%烧碱中浸泡消毒24h。
热蒸汽？
水线：
拆卸所有饮水器和接头等；
放置于3%烧碱中浸泡消毒24h；
水线在组装好后，在蓄水池中添加氯制剂或高猛酸钾等等，进行在管道中浸泡，用水循环冲24h；
热蒸汽？
办公室、食堂和宿舍
·重新进行粉刷；
·使用生石灰+烧碱混合成20%的生石灰乳或其他有效消毒进行消毒；
使用高锰酸钾和甲醛等熏蒸48h；
热蒸汽？
粪污处理
·使用100升/小时带热回收的连续处理装置，使含有非洲猪瘟病毒、猪水泡病病毒的猪粉浆，经过5分钟热处理。发现pB8，53℃把ASFV灭活至不能检出的水平。
法国著名养猪专家Philippe Greau
·65℃以上的热水；
·大量的生石灰（配备防护服，防护手套、眼镜、面罩）
·液态氢氧化钠（白化）
·卫可、酚类、甲苯酚等消毒剂。
大量的人力投入，专业化的管理，严格的工作流程
增加生物安全相关设施设备
·改造猪舍：实体围墙、赶猪密闭连廊、通水槽改造、小单位
·洗消烘干中心：墙外和场内（简易）
·洗消车辆设施：高温高压冲洗机
·火焰喷枪：
·各种自有车辆：拉猪车、转猪车、转猪台
·猪舍周边的碎石道、防蚊蝇的纱窗或无纺布、驱鸟器、蚊蝇灯、挡鼠板等
·检测设备：荧光PCR仪或快速检测设备
·简易玉米或饲料烘干筒、热风炉
·臭氧发生器、水处理设备
后备母猪营养关键技术
吴德同事--四川农业大学
一、后备母猪现状分析
·后非瘟时代“一猪难求”
·“是母猪就行”导致种源参差不齐，培育难度加大
非瘟前：
遗传背景：
—纯种vs杂交
—加系、美系或其他
颜值（体况）：
·四肢是否粗壮
·臀部是否丰满
·背部是否平直
·腹部是否凸凹有致
·乳头6对以上且左右对称
非瘟后：
·是母猪就行，管它几元的
·不用等到60kg有模有样后再挑选
·断奶就售卖，买得还欢快
·价格四五千，而非四五百
·一般人还没得卖
如何把“金猪”变成“金子”？
二、后备母猪关键问题
·种猪生产存在的主要问题
·后备母猪的育成率低（75%左右）
·头胎母猪的产仔数少（8头左右）
·二胎综合症突出淘汰率高（40%左右）
·母猪终身提供仔猪数量少（52vs76）
三、后备母猪营养策略
1、准确的阶段目标
2、适宜的能量水平
3、合理的能量来源
4、精确的饲喂模式
5、优良的饲料品质
6、增强的特殊营养
后备母猪提高免疫力的营养保健方案：
·多聚糖，苏氨酸，色氨酸，比标准高20%，维生素D（2000mg/kg）,硒（0.35mg/kg）和维生素E；
注射疫苗前后两周使用
·猪的最大骨质矿化要比最快生长率最钙、磷的需求量更高；
·从50kg体重开始，后备母猪日粮的钙磷水平比育肥猪至少要高0.1%；
补充高水平的铜、锌、铁、碘、锰微量元素，有助于提高母猪体内的储备从而能改善以后的繁殖表现。
总结
掌控后备母猪的体型，它是品质的保证
优化后备母猪的营养，它是繁殖力保障
增强后备母猪的防疫，它是效益的保证
唾液学监测的优势
樊福好
非洲猪瘟疫情严重影响了我国的生猪生产和肉食供应，造成了养猪行业的极大灾难。纵其原因，虽然众说纷纭，但检测方法的失当是导致疫情泛滥的重要原因之一。
据樊福好介绍，在正常生产情况下，病毒可能在1~2个月前就出现在唾液中了。因此，与血液检测相比，通过唾液检测，能够较早地发现猪只是否感染了病毒。
不仅如此，猪只感染ASFV后，首先出现在口腔中，时间可能长达2~3个月。“口腔内局部感染阶段是非洲猪瘟窗口期检测的重要时机，此时尚未形成病毒血症，积极采取措施还来得及。”樊福好表示，这也是实现传染病控制原则“早、快、严、小”的重要保证。
唾液样本的采集：获得新鲜的唾液（saliva）样本是准确诊断的前提条件之一。现行的鼻拭子（nasal swab）采样、口腔拭子（oral swab）采样以及肛门拭子（anal swab）采样存在样本陈旧、样本容易干燥、漏检率高等问题，已被逐渐淘汰。
唾液样本中的病原半衰期：唾液中含有丰富的具备活性的酶。机体健康状态不同，酶的含量也千差万别，从而导致唾液中的病原体半衰期（half-life period）长短不一，对于非洲猪瘟病毒来说，长者 2～3 天，短者 1～2 小时不等。病原半衰期的存在是导致唾液学非洲猪瘟病毒漏检率稍高的重要因素之一。
唾液样本的核酸保护：采集唾液样本之前加入适量的样本保护剂（Sample Protesis®），可以延长病原半衰期并保持唾液活性，含有保护液的唾液样本可以冷藏/冷冻运输及保存。
唾液样本的检测要求：采集的唾液样本要求清亮、透明并不得含有食物残渣，故采样之前的停食至关重要，原则上要求停食 12 小时以上。含有保护液的唾液中的核酸可以采用浓集法（concentration method）检测，即离心唾液，试管底部取样。
唾液样本检测对试剂盒的要求：由于口腔内的非洲猪瘟病毒感染往往处于初始阶段，病原核酸含量相对较低（CT 值在25～30 之间，未加保护液的唾液样本 CT 值往往在 32 以上），所以对非洲猪瘟病毒核酸检测试剂盒的敏感性要求较高，要求尽量能够实现单拷贝（single copy）检测。
阳性结果处置：对于唾液检测中非洲猪瘟阳性结果（+），存 在两种处置方案。一是严格剔除（“拔牙”，stamp out）阳性猪只，实现净化生产。二是控制阳性猪群的移动，尝试实施早期带毒生产（局部感染而非病毒血症），最终实现净化生产。
很多养猪科技工作者把带毒生产简单理解为血液中可以带毒是非常危险的，也是绝对禁止的。只有控制局部感染才有净化猪群，消除病毒携带状态的可能性。
疫情场重建的评估
闫之春·新希望六和
闫博士在报告中指出：
1、在中国的实践证明，通过猪群和场区的全覆盖采样、及时检测、精准剔除，实现新时代的检测剔除法，在场区群内净花非洲猪瘟。
2、疫情污染场的复产，应根据猪群发病的程度、过程，评估场区的污染情况这的复产分类管理。复养场应想据临床症状、检测结果，尽司能追朔清楚感染源，为改进生物安全措施打好基础。
3、复养猪场应重新界定生物安全区， 明晰不同等级的界线和关口，做好关口的风险载体管理。
4、场区网格化处置，分格定点清除是污染场处置的最好办法。
5、复养并非难事。
总结
在中国的实践证明，通过猪群和场区的全覆盖采样，及时检测、精准清除，实现新时代的检测清除法，在场区群内净化非洲猪瘟，
疫情污染场的复产，应根据猪群发病的程度、过程，评估场区的污染情况，把场区的复产分类管理，复养场应根据临床症状、检测结果，尽可能追溯清楚感染源，为改进生物安全措施打好基础。
