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近年来，非瘟疫苗在全球范围内获得显著突破，我们今天就来讲一讲疫苗到底研究到了哪一步。
一、灭活苗
在非洲猪瘟疫苗的研究历史中，灭活苗是最早被开发出来的，不同实验证实灭活苗的保护率只有0%-70%。
可分为病毒灭活和病毒致弱灭活；
不能对强毒攻击提供有效的免疫保护；
可产生高效价的抗体，很难检测到中和抗体；
新型佐剂 Polygen 或 Emulsigen-D的应用：可产生ASFV特异性抗体，但未能提高疫苗的免疫保护效力；
细胞免疫在ASF灭活疫苗免疫保护中起重要作用；
低代次和高代次的ASFV毒株对中和抗体的敏感性存在差异。
二、减毒活疫苗
可以诱导强烈持久的免疫应答，与其他类型疫苗相比，弱毒苗的保护性更高，但生物安全是其使用的主要限制因素。
目前可通过基因重组、靶向缺失以及一次性侵染技术来增强减毒活疫苗的安全性。
弱毒苗主要分为自然弱毒苗、传代弱毒苗和重组弱毒苗。
1、自然弱毒苗
自然弱毒苗是从自然界中分离到的非洲猪瘟弱毒株，如天然致弱毒株OURT88/3或NH/P68；
自然弱毒苗可以产生对同源强毒株的攻毒保护，依据实验动物和攻毒毒株的不同，保护率介于66%-100%；
OURT88/3毒株产生的免疫保护与病毒特异性IFN-γ产生细胞呈正相关；
交叉保护疫苗: OURT88/3免疫并用致病性OURT88/1毒株进行加强免疫，产生针对 ASFV-I型不同分离毒株的保护；
这类疫苗在强毒攻毒的实验中得到的保护率很高，很多可以达到100%，但是副作用和安全性问题突出。副反应: 发热、关节肿胀、肺炎、流产、死亡等，慢性感染；
其中研究比较多，比较有前景的是Lv17/WB/Rie1毒株。
图1 已公开的自然弱毒苗
2、传代弱毒苗
强毒株经过猪骨髓来源细胞、Vero和COS-1等敏感细胞系进行的传代致弱。
ASFV致病力逐渐下降，但病毒免疫原性和稳定性也随之下降；
1960年代，西班牙和葡萄牙使用传代致弱毒株免疫动物用于非瘟净化，但是产生了灾难性的后果， 呈现出肺炎、流产和死亡等副作用；
田间多次感染和异源强毒株存在的条件下，免疫动物呈现ASF慢性感染。
3、重组弱毒苗
一般通过敲除病毒功能基因、毒力基因、免疫抑制基因来设计疫苗；
降低病毒毒力或增加机体对病毒的免疫应答；
比传统弱毒疫苗安全性更好, 效力更高的基因工程减毒活疫苗；
目前研究设计的毒力基因包括TK(K196R)、9GL(B119L)、CD2v(EP402R)、DP148R、 NL(DP71L)、UK(DP96R)和多基因家族360，505(MGF360/505)
缺失毒株接种宿主毒力减弱, 产生针对同源毒株或异源毒株的免疫保护
图2 已公开的重组弱毒苗
三、活载体疫苗
通常使用腺病毒或痘病毒作为载体：可引起细胞免疫和CTL反应；
“鸡尾酒”式免疫：
人腺病毒Ad5载体+ ①ASFV-p32、p54、p72和pp62；或②ASFV-A151R、B119L、B602L、EP402RΔPRR、B438L和K205R-A104R；
可引起良好的抗原特异性CTL反应，以及强烈的体液免疫反应和细胞免疫应答。
四、核酸疫苗
将编码病毒主要抗原的基因克隆入真核表达载体后直接导入机体内，在宿主细胞内完成转录翻译后产生抗原蛋白，从而同时激活体液免疫和细胞免疫应答。
ASFV DNA疫苗(p72、p30和p54)：不能够提供攻毒保护；
ASFV DNA疫苗(p30、p54、猪白细胞抗原II)：无ASFV抗体，部分动物获得攻毒保护；
ASFV DNA疫苗(表达文库)：60%的保护力，有待于发掘更多保护性抗原；
五、亚单位疫苗
杆状病毒表达系统：p72、p30和p54等，不能提供有效的免疫攻毒保护，说明仅仅依靠上述抗原刺激产生的中和抗体很难 获得理想的免疫保护效果。
人源293(HEK)细胞表达系统：B646L(p72)、E183L(p54)和O61R(p12)，与痘病毒载体疫苗进行首免-加强免疫，获得较好的体液免疫和细胞免疫水平。
六、展望
对于减毒活疫苗来说，无论是采用经典方法还是通过基因操作，它们都能提供较好的保护水平，（至少对同源毒株是如此）。这一战略被认为更接近市场，几乎所有的研究小组都寄希望于此。
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