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第十届李曼中国养猪大会会前论坛-新一代养猪兽医研讨会（森康生物赞助）暨莫瑞森科学实践奖（牧原食品赞助）在悦来国际会议中心举行。本次大会由华南农业大学教授何启盖、新希望六和首席科学家闫之春主持。
大会笔记精彩内容如下：
1.批次化生产实施过程中暴露的问题探讨
余奎，加农正和
“新一代养猪兽医研讨会暨莫瑞森科学实践奖”在加农正和余奎先生的“批次化生产实施过程中暴露的问题探讨”报告中拉开帷幕。
目前猪业市场从行情红利变为管理红利时，猪场从过度关注生物安全体系变为兼顾关注低成本养猪体系。同时，非瘟常年散发，批次化生产是集团猪场防非必须采用的生产模式，但是生产成绩远远低于非瘟之前的水平。且在实施批次化过程中，大部分猪场都只关注设计生产模式和药物饲喂流程的研究，而不注重批次化应用中生产管理关键点的调整。
本次报告的目的是在批次化模式下，找到提高猪场生产成绩的生产管理关键点，包括子宫炎控制、短期优饲、公猪诱情、配种操作、异常母猪管理、数据分析，以及建立批次化生产模式下，配种生产操作的九步标准流程，即子宫炎症控制、集中筛查、短期优饲、公猪诱情、精液检查、适时输情、配种操作、异常母猪管理和数据分析。
2.批如何降低母猪场发生非洲猪瘟的风险
王伟松，丹俄国际
随后，丹俄国际王伟松先生作了“如何降低母猪场发生非洲猪瘟的风险”的精彩报告。
目前，非洲猪瘟病毒（ASFV）是全球猪肉生产的最大威胁。在过去三年的时间里，在中国的养猪业造成了巨大的经济损失。进入中国后，关于母猪场感染非洲猪瘟的流行病学调查，以及新场启动至胎次结构成熟的三年内母猪场发生非瘟的风险概率分析和主要风险因素调查甚少，无法给行业防控非瘟提供有效参考，同时感染非洲猪瘟的潜在风险途径很多，缺少一种工具来评估母猪场感染非瘟的风险。而本次就围绕以上这些不足，进行研究并确定母猪场感染非瘟的风险因素，来为母猪场的生物安全升级和成本控制提供参考，并通过对非瘟发病因素的回溯性分析，建立一个评估母猪场发生非瘟风险的工具。
经过充分的研究后，相关数据表明，种猪场的非洲猪瘟流行率低于商品母猪厂，北方流行率高于南方，且新场启动至胎次结构成熟的三年内母猪场发生非瘟的风险很高。猪场暴发非洲猪瘟的最重要风险因素包括场外引种、无洗消中心、无外部出猪台、休假频率（<2个月）、精液外购和无人员培训。围绕这些因素，根据风险因素调查结果，建立一种非瘟感染风险评估工具，当使用该评估工具评分低于60分时，发生非洲猪瘟的风险显著提高。这就要求猪场通过内部更新后备母猪、建设洗消中心、外部出猪台、内部精液供应、人员培训、人员隔离、生物安全审计等方式来降低此风险。
报告结束后，观众围绕“OR值越大是否风险越高？除了您这边提及的高风险因素，还有其他疏忽的OR值小于1的因素？RR值和OR值的数据使用方式是否有区别？”进行了提问。
3.猪场自建非瘟检测实验室的常见问题及解决方案
吕浩，猪事安
猪事安（杭州）技术服务有限公司的吕浩先生带来的报告“猪场自建非瘟检测实验室的常见问题及解决方案”。
报告通过列举目前非洲猪瘟检测实验室发生的常见问题，包括实验室污染、假阳性、试剂盒的稳定性、人工效率、内参与内标的区别、疫苗毒的鉴别诊断等。这就要求，定期做好实验室的清洁消毒，使用精准度高的移液枪及带滤芯枪头，使用超净工作台，加样后去除气泡，同时对试剂盒定期梯度稀释及固定阴阳性样品验证，尽量使用自动核酸提取仪，弄清内参及内标的实质，同时结合临床，并使用疫苗毒鉴别诊断试剂盒验证。检测将在未来养猪的过程中发挥越来越重要的作用，这就要求自建非洲猪瘟检测实验室，需要第三方的专业服务团队去解决专业的问题。
报告结束后，观众围绕“针对猪场检测的抗体呈阳性，但病原呈阴性这一问题，是否有好的经验和方法？”进行了提问。
4.非洲猪瘟检测技术研究进展
吴晓东，中国动物卫生与流行病学中心
之后，来自中国动物卫生与流行病学中心的吴晓东主任报告了“非洲猪瘟检测技术的研究与应用现状”。
首先《非洲猪瘟诊断标准》代替了之前的标准，最新国家标准增加了生物安全措施、临床诊断以及实验室诊断样品采集和处理。同时增加了ASFV病原的检测方法，包括荧光PCR方法、荧光RAA方法、高敏荧光免疫分析法和夹心ELISA抗原检测方法。而针对ASFV抗体的检测方法增加了阻断ELISA抗体检测方法、夹心ELISA抗体检测方法和间接免疫荧光方法。
其中用于ASFV阳性/可疑样品的确诊，有间接免疫荧光试验（IFA）、免疫过氧化物酶试验（IPT）和免疫印迹试验（IBT）三种新方法。IFA基于对ASF抗体的检测，这些抗体结合了被ASFV感染的细胞。抗体-抗原反应由标记的荧光素A蛋白检测，阳性样本显示感染细胞细胞核附近的特异性荧光，血清样品需要56℃灭活30min。IPT是在固定细胞上通过过氧化物酶的作用，来测定抗原-抗体反应的免疫细胞化学技术，待检样品和对照1/40稀释，不需荧光显微镜即可进行结果的观察判定。而IBT是将聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的ASF病毒蛋白，以恒定的电流强度转移到硝化纤维素膜上，并切成含有IP15、IP23.5、IP25、IP25.5、IP30、IP31、IP34和IP35的条状，这些条带上的蛋白质可与急性期和恢复期猪血清抗体发生反应。
报告结束后，观众围绕“不同试剂盒的检测结果差异怎么解决？不同PCR测试仪的检测结果差异怎么解决？荧光PCR的检测结果阳性到底是活的还是死的？”进行了提问。
5.种猪场的伪狂犬净化策略及经济学分析
朱广楠，丹俄国际
随后，来自丹俄国际的朱广楠经理，对种猪场的伪狂犬净化策略进行了经济学分析。伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的烈性传染病，在我国广泛流行，给养猪业造成巨大危害，也是对全球养猪业危害最大的疾病之一，因此，如何快速有效净化伪狂犬病，以及对净化投资与回报收益的评估，始终是养猪从业人员关注的重点。在此，为控制和净化伪狂犬提供一种可行性方案，并通过投资回报分析，为伪狂犬阳性猪场采用何种方式进行伪狂犬的净化提供决策参考。报告通过具体案例分析，可通过升级生物安全体系、猪群摸底、调整免疫程序、监测哨兵猪的综合管理措施，用17周的时间阻断了伪狂犬病的垂直传播和水平传播。又通过净化措施，可以让种猪伪狂犬阳性率为98.4%的2 400头规模的种猪场，每年降低免疫成本478 407.50元；妊娠舍全年可减少NPD14 794头*天，每年节约成本232 596.00元；分娩舍多产出仔猪2 726头，增加销售额21 566 000.00元，全年增加收益22 277 003.50元。同时将检测淘汰的净化方式与清群复养的方式相比，可节约成本40 608 285.5元。
6.新式聚落化猪场PED防控实践
吴伟胜，新希望六和
茶歇前最后一场为来自新希望六和的吴伟胜作了“新式聚落化猪场PED防控实践”的精彩报告，本次报告从PED的研究背景、材料与方法和结果与分析三大内容进行。PEDV是对猪场危害最大的消化道疾病病原之一，其造成产房的高死亡率，影响满负荷生产，严重影响生产成本。目前，大量新建群和复产群，低胎次母猪处于PED的高风险状态，而不彻底的处理方案会导致疾病在场内长时间循环。因而，PED强毒主动驯化的方法，能够给聚落化养殖体系良好控制效果，同时强毒接种能够提供良好的IgA抗体产生并对仔猪提供有效保护，接种后通过有效消毒和猪群流动控制，能够有效控制环境中的病毒载量控制发病，PEDV检出后的主动干预相比被动处理的损失显著降低。报告结束后，观众围绕“PED主动驯化的方法步骤”进行了提问。
7.细菌快速显色技术介绍
王贵平，湖南农业大学
背景介绍：
目前养殖场水种细菌总数检测方法为菌落总数测定（CFU）计数技术，该方法完成时间也较长。
研究目的：
研究一种养殖场水中细菌浓度现场快检技术，代替CFU计数技术，为养殖场饮用水中细菌总数现场检测和现场评估消毒剂消杀效果提供了一种新型技术支持。
实验结果：
结论与应用：
原理：细菌快速显色技术的原理是研发的无色或浅色试剂可以使细菌快速变为深颜色
应用场景：现场快速检测养殖场饮用水中细菌总数是否超标；现场快速评估消毒剂消杀效果。
优点：现场快速、操作简便、判定结果可视化和成本低廉等特点
小结：可以代替CFU计数技术。
8.非洲猪瘟检测中内参与内部阳性对照的区别
孙鑫滔，猪事安
背景：后非瘟时代，市面上的非洲猪瘟试剂盒越来越多；选择一款合适的试剂盒进行检测，尤为重要。
研究目的：证实内参和内部阳性对照有本质的不同，即使都是含有内参的试剂盒，所测的猪的内源性基因的位点也不一样。为更多的猪场提供借鉴，选择适合自己检测需求的试剂盒尤为重要。
结论：内参和内部阳性对照有本质的不同。内参测的是猪的内源性基因，确定样品是否与猪相关；内部阳性对照是为了排除抑制PCR反应的物质存在。
即使都是含有内参的试剂盒，所测的猪的内源性基因的位点也不一样。
9.母猪场非瘟复产方案的选择
王博，丹俄国际
简介：随着非洲猪瘟在国内的流行，遭受非洲猪瘟打击的猪场面临如何快速且安全地复产的问题。如何控制复产投资成本且能保证最终成功复产成为农场主的主要关注点。
研究目标：因此，如何既保证质量又保证效率地做好非瘟复产成为一个值得探讨的问题。本项研究对非瘟复产农场采取的两种不同复产方案进行了多角度分析，这将为中国猪场在暴发非瘟后进行复产的投资成本、工作效率和员工满意度提供参考。
结果-两种复产方案的制定
结果-两种复产方案的经济分析对比
结论：
回溯性分析中的结果可知，非瘟通过气溶胶、粉尘和飞沫传播已经在全场传开，尽快清群复产是理智的选择。
由两种复产方案的结果分析可知，传统方案付出更多的时间成本和人力成本（90天，30人，1,271,191元），导致最终总成本远高于快捷方案（60天，20人，713,416元）。
快捷方案（595元）人效低于传统方案（471元），但因快捷方案员工不需要加班工作，因此人效略低于传统方案。
通过工作满意度调查可知，快捷方案员工的工作强度低，员工满意度平均值更高（快捷方案4.14vs传统方案3.17），情绪更稳定（快捷方案CV0.153vs传统方案CV0.252）。
10.PRRSV监测在猪场PRRS防控中的应用和案例分
杨小康，江苏立华
PRRS监测内容：（实验室监测+生产监测）
1、实验室监测
阳性场以抗原检测为主，双阴场以抗体检测为主；密切关注母猪群的生产，特别是流产、早产高于日常标准时，采集已经发病的母猪血清检测抗原抗体；
双阴场的抗体S/P值0.4以上为阳性，0.2~0.4为可疑；用于测抗体的血样，采血后将注射器针头端向上直立静置半小时后再进行送检；
所有样品冷藏快速送实验室检测，如不能及时送实验室检测，冷冻保存（未分离的血清冷藏保存）；
所有抗原检测采用q-PCR，Ct值低于30的样品进行测序。
2、生产监测
猪群临床症状；
流产数据（周或月为单位）；
产房窝均死胎数据下游保育猪生产情况。
案例分享一
防控方案
防控效果
1月23日（第4W）全群普免蓝耳，免疫后1周内流产数增多，之后开始出现零星流产；2月底进行加免，猪群已稳定；免疫后1个月内产房死胎数大幅增加，之后开始逐渐趋于正常
产房仔猪转保成活率有所下降，很快恢复正常生产。产房继发感染较轻。
案例分享二
流产数大幅上升
防控方案
防控效果
流产数显著降低，月度产房窝均死胎数显著降低，平均转保成活率显著升高，到6月份为93.73%。
总结：
对生产持续影响时间：
结论：
通过PRRSV监测可提前发现场内异常，并提前预案；
PRRS给猪场带来的损失的多少，与综合防控方案实施时间密切相关；
PRRS弱毒活疫苗两针防控效果，优于一针；
双阴场发生PRRS的损失高于阳性场。
关键点：
发现及时、处理果断、执行力强
11.非瘟抗体试剂盒的对比、检测的操作步骤和数据分析应用
刘翠翠，猪事安
背景
农业农村部通知：非洲猪瘟病毒抗体阳性视为感染猪群，不得开具检疫证明，不得出栏，不得上市。
国家非洲猪瘟参考实验室：将非洲猪瘟抗体检测加入到了主动检测的范畴，也就是非洲猪瘟要进行抗原和抗体双检的时代。
市面上有很多种非洲猪瘟抗体检测试剂盒，如何选择使用，成为个问题。
研究目的
市面上有很多种非洲猪瘟抗体检测试剂盒，如何选择使用，是个问题。通过对几类试剂盒的对比分析，为试剂盒的选择提供依据。
材料和方法
市面上现有的试剂盒
结果与分析
17个间接ELISA试剂盒：检测IgG抗体17
12个阻断ELISA试剂盒：检测IgG抗体12
4个夹心ELISA试剂盒：检测IgA、IgG、IgM等总抗体
非洲猪瘟感染之后IgM抗体产生时间大概5-7天，IgG抗体的产生时间7-14天。
3个试剂盒对比分析
P30抗原：主要结构蛋白由CP204L基因编码，在病毒感染的早期表达，可用于ASF感染早期诊断。
P72抗原：结构蛋白，由B646L基因编码，在大多数毒株中相当稳定，能与所有感染猪的血清发生免疫学反应，且其抗原性非常稳定。该蛋白是血清学诊断方法的理想抗原，常被用于抗体检测。
结论
对于精准剔除：选择夹心ELISA可能比常规的检测IgG的要早3天。
对于已经发生非洲猪瘟的猪场：选择敏感性高的试剂盒。
对猪场进行净化：先用敏感性高的实行初筛，再用特异性高的复核。
无非洲猪瘟感染的猪场：选择特异性高的试剂盒。
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