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重磅!无需疫苗了!中国抗非瘟猪种找到了

中国兽医学报 2020-03-31

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本研究通过攻毒试验确认了LSG2猪抗ASFV基因II型 强毒株SY18 的特性。是世界上迄今发现的唯一 ASF 抗性大白猪品种。
  非洲疣猪、丛林猪、巨型森林猪等非洲野猪可感染ASFV,但临床上不发病,具有天然抗ASFV特性,但从未报道抗ASFV家猪的存在。2020年3月18日,军 事 兽 医 研 究 所,北京畜牧兽医研究所,哈尔滨兽医研究所,山东蓝思种业股份有限公司的研究人员在兽医类一级核心期刊(北大核心期刊目录)《中国兽医学报》在线发表了题为: “我国蓝思白2号猪抗非洲猪瘟特性鉴定” 的研究论文,介绍了山东蓝思种业股份有限公司选育并初步认定的 “非洲猪瘟抗性猪” 蓝思白2号(LSG2)猪的ASFV强毒株SY18攻毒试验,并对其抗感染应答特征进行了分析,报道了世界首例ASF 抗性大白猪品种。
  
  研究使用6头10周龄LS-2猪,6头普通10周龄大白猪为试验猪,均为ASFV抗原抗体双阴性。在P3实验室正常饲养21天后进行ASFV口服攻毒试验,攻毒剂量为106.0 TCID50,攻毒前后每日测定体温,每3天采血1次。同时观察攻毒后猪只的临床表现,包括精神、食欲、卧地情况、粪便性状、皮肤颜色等。连续观察28天终止试验。期间对垂死猪只进行剖检和组织采样,28天试验结束时,对存活猪只进行剖检和组织采样。
 
疫苗
  ― 为普通家猪   ―为LSG2猪
  
  图1 普通家猪在10天内全部死亡(6/6),LSG2猪仅1头死亡,且发生在攻毒后23天(相对于普通家猪而言死亡被延迟),其余5头全部健活。
  
疫苗
  注:●为普通家猪  为LSG2猪  × 为死亡个体
  
  图2 普通家猪感染 ASFV 后3天即出现较高水平的病毒血症 (6/6),6天病毒血症水平持续升高;而 LSG2猪9天才部分开始出现病毒血症 (3/6),且病毒含量较低 (实时 PCR<100拷贝/μL),随后消失,仅 1只 LSG2猪病毒血症自出现后持续升高,直至死亡。
  
家猪感染
  ― 为普通家猪   ―为LSG2猪
  
  图3 普通家猪于攻毒后3~9天出现发热、厌食、精神沉郁、喜卧等表现,最终死亡;而 LSG2猪攻毒后只出现轻度发热,持续不同时间后恢复正常,临床表现正常,无厌食、精神沉郁、喜卧等症状。
  
家猪
  ― 为普通家猪   ―为LSG2猪
  
  图4  ELISA 方法检测2组实验动物感染 ASFV后血清中p54抗体水平变化,结果显示普通家猪直到死亡之前,体内针对p54的抗体水平一直很低;而LSG2组中p54抗体水平于攻毒后12天普遍开始转阳,且之后持续升高,仅延迟死亡的个体血清中p54抗体水平一直较低。
 
数据
  
  在体温测定结束后,针对其中2头抗性猪(表1 A,B)进行解剖,采集各种器官组织,分别进行 ASFV 实时 PCR 检测,检测结果显示,抗性猪 A(试验过程中无其他病原感染) 仅在骨髓、睾丸、尿中检测出 ASFV 核酸,而抗性猪 B(试验过程中表现体质较弱,剖检见后有心包酪样物)在血液、骨髓等组织中 ASFV核酸阳性。对 A 和 B 中阳性样品进行 ASFV 细胞分离,结果均呈阴性。
 
表2
  
 
表3
 
  攻毒前,LSG2猪的促炎因子TNF-α显著高于普通家猪,促炎因子IL-6和IL-12则无明显差别;攻毒后6天,促炎因子TNF-α无明显差别,但IL-6和IL-12,LSG2猪则显著低于普通家猪组。
  
  攻毒前,LSG2猪的抗炎因子TGF-β2显著低于普通家猪;攻毒后6天,LSG2猪TGF-β2升高1~2倍,普通家猪则降低3~6倍。IL-10两组猪在攻毒前后无明显差异。
  
监测结果
 
  图5 普通家猪在濒死时,脾、肺、肾等内脏器官均严重出血,肺泡内有渗出液及大量炎性细胞浸润,为典型的 ASF病变;而 LSG2猪在攻毒后28天剖检时,脾、肺、肾等结构均正常,仅肺脏中肺泡呈现轻微融合、扩张。
  
  评论
  
  本研究通过攻毒试验确认了LSG2猪抗ASFV基因II型 强毒株SY18 的特性。是世界上迄今发现的唯一 ASF 抗性大白猪品种。但在如下几个方面仍然需要进一步深入探索:(1)本研究采用的攻毒方式为口服。但猪场感染的方式除了经口途径之外,还存在医源性途径和短距离空气传播途径,仍然需要设置肌肉注射攻毒组和同居实验组;尽管论文中提到了养猪场在田间将LSG-2猪作为哨兵猪与ASFV发病普通家猪混养,持续观察哨兵猪1年,发现哨兵猪1年内一直没有表现ASF临床症状,但这一结果仍然需要科学的试验进行验证,即设置同居实验组进行相关临床症状观察和各类指标检测;(2)不同ASFV分离株的致病特性存在差异,本研究采用了单一毒株SY18进行攻毒,缺少其他毒株攻毒作为对比评估,所以无法做出综合的评价;(3)从病理切片可以看到,LSG-2攻毒猪的肺脏仍然存在炎性渗出物,说明抗炎治疗对于这种ASFV抗性猪仍然是必要的。

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