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诊断技术:可以测量对蓝耳病的保护水平吗?

pig333 2019-10-18

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该病毒的高度遗传多样性不仅使实验室检测复杂化,而且也使评估针对蓝耳病病毒的保护水平变得复杂。
  该病毒的高度遗传多样性不仅使实验室检测复杂化,而且也使评估针对蓝耳病病毒的保护水平变得复杂。
  
  衡量猪对各种病原体的保护水平是复杂的,且有时效果不佳。测量针对特定病原体的各种可能与保护水平相关的免疫反应。然而,就猪蓝耳病病毒而言,尚不清楚其保护的相关性,这意味着没有实验室检测能够明确测量对蓝耳病病毒的保护水平。
  
  为了测量保护水平,可以测量免疫系统的体液或细胞反应。最常见的蓝耳病病毒免疫反应测定方法是通过ELISA法检测抗体。ELISA试验通常检测针对蓝耳病病毒核蛋白(一种高表达的病毒蛋白)的抗体。这些抗体与保护水平无关,且仅在动物以前接触过蓝耳病病毒的情况下才能实施(Lopez,2007)。但无法区分其是针对减毒活疫苗的抗体,还是针对田间病毒的抗体。且这些试验无法区分母源抗体和仔猪主动免疫产生的抗体。
  
  测量免疫应答和对蓝耳病病毒保护水平的其他方法包括测量中和抗体或细胞免疫应答。两者都可能起到保护作用,但对其在蓝耳病病毒免疫中的相关性仍存争议。蓝耳病病毒中和抗体通常在从血液中清除蓝耳病病毒时出现,表明中和抗体在病毒清除中起着关键作用。在实验研究中,高剂量的中和抗体可预防胎儿经胎盘感染蓝耳病病毒,并对母猪和子宫中的仔猪提供无菌免疫力(Osorio,2002; Lopez,2007)。但其他实验表明,在没有可测量的中和抗体水平的情况下,已从感染动物的血液中清除了蓝耳病病毒(Diaz,2006年),或在存在中和抗体的情况下,仍可从感染猪的血液中分离出蓝耳病病毒(Vezina,1996年)。最后,尚不完全清楚中和抗体在蓝耳病病毒保护水平中的作用,在常规诊断中对其进行测量是不可行的(见下文)。
  
  尽管细胞免疫反应可能是保护性免疫反应的关键,但与体液免疫反应相比,对蓝耳病病毒感染引起的细胞免疫反应的研究不多。通过酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测蓝耳病病毒特异性γ-干扰素(IFN-γ)分泌细胞是最常用的细胞免疫反应检测方法。与蓝耳病病毒特异性中和抗体的测定类似,目前的ELISPOT分析不太适合于常规诊断,因其费时费力且成本高昂。其需要从血液或组织中分离细胞,并用同源蓝耳病病毒重新刺激这些分离的细胞。除了测量疫苗诱导的细胞免疫反应外,同源的蓝耳病病毒分离株通常不可用于细胞的再刺激,因猪场不常规进行蓝耳病病毒分离。对于也需要同源病毒的中和抗体的测量也是如此。
  
用96孔板酶联免疫斑点法测定蓝耳病病毒特异性γ-干扰素(IFN-γ)分泌细胞的实例
  用96孔板酶联免疫斑点法测定蓝耳病病毒特异性γ-干扰素(IFN-γ)分泌细胞的实例。
  
  该病毒的高度遗传多样性不仅使实验室检测复杂化,而且也使对蓝耳病病毒的保护水平的评估复杂化。一些研究表明,用完全相同的病毒连续感染猪可以达到完全保护,即无菌免疫(Lager,1997,1999)。也已证明,同源保护可以持续至少604天(Lager,1997)。然而,获得一种蓝耳病病毒株保护的动物不一定对异源菌株有保护作用。异源保护的水平可能相差很大,无法预测。序列分析,特别是在常规诊断中最常见的部分病毒基因组上进行的序列分析(如ORF5),不能用于保护性评估。特别地,特定田间病毒与不同疫苗病毒分离株之间的同源性不能用于疫苗选择。除了病毒的变异性外,宿主因素也将影响异源保护的水平。主要在美国进行的研究表明,宿主基因组,即猪的遗传背景,正在影响对蓝耳病病毒的易感性。

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