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要点：
腹股沟浅淋巴结 (SILN) 样本污染风险低，无需专业技能即可快速收集
有证据表明，除了一些例外，SILNs可以作为筛查ASFV的可靠样本类型
非洲猪瘟（ASF）无疑是目前影响全球养猪业最严重的猪病。ASF病毒 (ASFV) 在家猪和野猪中引起过急性和急性疾病，并可能在感染后两周内导致死亡。ASFV传播通常通过口或鼻(口-鼻)接触发生，通过直接接触受感染的动物或污染物，或食用受污染的饲料。病毒在扁桃体和局部淋巴结中复制，通过血液和淋巴系统传播，在2-3天内扩散到次级淋巴器官。因此，脾脏是检测 ASFV 的良好器官，但需要打开尸体以获取样本。剖检会造成环境污染和随后传播ASFV的风险。世界动物卫生组织（OIE）推荐的死猪样本包括脾脏、淋巴结、骨髓、肺脏、扁桃体和肾脏。然而，获取这些样本需要解剖，这很耗时，需要熟练的劳动力，而且往往会导致场所污染。在这项研究中，腹股沟浅淋巴结 (SILN) 被提议作为一种样本类型来检测 ASFV，因为它们易于收集且环境污染最小，并且不需要熟练的劳动力。
图1 腹股沟浅淋巴结是一种可快速采集的猪样本类型，无出血/少量出血
在所有实验中，均使用4-5周龄断奶猪，使用5种ASFV毒株（爱沙尼亚2014、加纳20、尼日利亚RV502、越南2561和格鲁吉亚 2007/1）对实验猪口鼻、肌内或间接感染（通过接触接种病毒的猪）进行了6项系列实验。所有被安乐死的动物均在人道终点（第7-22天之间）进行。在死亡或安乐死时收集所有猪的SILN和脾脏样本。使用定量实时PCR检测ASFV 基因组 DNA。计算了来自脾脏和SILN的ASFV 基因组拷贝数之间的 Pearson相关系数。
猪的临床症状因ASFV毒株类型而异，包括发烧、嗜睡、便血和直肠出血。当将脾脏中的ASFV基因组拷贝数与SILN中的拷贝数进行比较时，对于所有中等毒性（爱沙尼亚 2014）和高毒性（加纳20、尼日利亚 RV502、Vietnam2561、Georgia 2007/1) ASFV 毒株，脾脏样本中的病毒量与 SILN 样本呈正相关（r=0.77），置信度高（p<0.0001）。对于中等毒力毒株 r=0.85 和仅对于高毒力毒株 r=0.70。无论ASF毒株如何，SILNs与脾脏中的基因组拷贝数高度相关，表明它们是ASFV检测的合适样本类型。
表1 感染不同ASFV毒株的猪全血、SILN和脾脏中ASFV实时PCR检测和基因组拷贝数
图2 a、d是所有毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性，b、e是爱沙尼亚毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性，c、f是强毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性。在脾脏和 SILNS 中检测到的 ASF 基因组拷贝数呈正相关（r=0.77、r=0.85 和 r=0.7），具有统计学意义（p<0.0001）。当进行非配对 t 检验时，平均基因组拷贝数之间没有显著差异，除了在高毒力菌株中，平均基因组拷贝数有显著差异**（p = 0.0062）。
将脾脏和腹股沟淋巴结ASFV平均病毒载量进行比较时，脾脏样本要略高于腹股沟淋巴结，但是把所有样本放到一起分析时，两者之间统计学差异不显著。
这项研究显示初步证据表明，当无法或不希望进行完整的尸检时，SILN可用作快速筛查死猪ASF的可靠样本类型。使用SILN筛查死猪的方法可能使无ASF国家和ASF流行国家能够简化和扩大其对ASF的监测。尽管本研究中提供的数据来自家猪，但采样方法同样有益并适用于野猪的ASF监测。何时使用此方法的一个考虑因素是，基于SILN的检测不适用于怀疑其他传染源（如PRRSV、PCV2或细菌感染）的家猪的常规疾病调查。
