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空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

哼哼会 2021-05-12

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H.C. de Carvalho Ferreira等将3种毒株(高毒力毒株-巴西’78毒株、中等毒力毒株-荷兰’86和马耳他’78)接种试验猪后,采集猪上方1m高度的空气样本,另外同时采集咽拭子和粪便样本。结果显示高毒力与中等毒力毒株接种后的猪只上方空气样本,可以检测到ASFV核酸;进一步分析发现,空气中病毒含量与粪便排毒呈正相关。

非洲猪瘟病毒因其接触传播方式,以及高致死率(90-100%),被传为“坐在轮椅上的杀手”,中国养猪界也因此创造性的开发出“精准剔除”技术,应用于控制非瘟的传播。其中不少猪场按照总结拔牙策略执行,依然失败,排除执行力的原因,推测非洲猪瘟是否还存在另外的传播方式呢?笔者查阅相关文献发现,非洲猪瘟可能还存在空气传播途径。下面两篇关于非瘟空气传播的文献,笔者为您解读。

 

一、荷兰科学家H.C. de Carvalho Ferreira证明空气传播ASFV

 

H.C. de Carvalho Ferreira等将3种毒株(高毒力毒株-巴西’78毒株、中等毒力毒株-荷兰’86和马耳他’78)接种试验猪后,采集猪上方1m高度的空气样本,另外同时采集咽拭子和粪便样本。结果显示高毒力与中等毒力毒株接种后的猪只上方空气样本,可以检测到ASFV核酸;进一步分析发现,空气中病毒含量与粪便排毒呈正相关。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图1:空气传播非洲猪瘟病毒的定量研究

 

1.1.动物接毒:

 

研究使用了3种ASFV毒株:高毒力毒株-巴西’78毒株、中等毒力毒株-荷兰’86和马耳他’78高毒力巴西株免疫10头实验猪,剂量为4.5 log10 TCID50 ;

 

中等毒力荷兰毒株和马耳他毒株各免疫3头实验猪,剂量分别为3.5 log10 TCID50 和 3.0 log10 TCID50 ,另外各放置7头猪作为中等毒力毒株的同居猪。

 

1.2.样本的收集:

 

▶空气样本:

 

在试验猪栏,取猪上方约1m高度的空气采样10分钟。接种后0~ 27d,每周采集3次空气样本。从第28到实验结束(第70天),每周采集两次空气样本。另外巴西高毒力组,猪栏空气出口,也采集样本。

 

▶咽拭子和粪便样本:

 

每只试验猪,第0-13天,每天采集口咽拭子和粪便样本;从第14-27天,每周采集3次;巴西组(高毒力)在第 0- 9天,每周采集3次。第28至实验结束(第70天),高毒力和中等毒力组每周采集2次。

 

1.3样本检测与分析

 

使用qPCR和统计学软件进行检测和数据分析

 

1.4实验结果:

 

1.4.1高毒力巴西毒株

 

接种后,第4天可在猪上方空气样本和出口处空气样本中检测到病毒DNA,并持续到第9天(猪死亡),如下图2所示。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图2:巴西高毒力毒株接种后,咽拭子、粪便、上方空气、出口处空气病毒检测结果

 

注:OPF-咽拭子、Feces-粪便、Air filter(above the animals)-猪上方空气样本、Air filter(air exit)-出口处空气。

 

1.4.2中等毒力毒株马耳他

 

中等毒力马耳他接种后,从第5-20天,空气带毒;咽拭子(OPF)在试验结束依然能能检出病毒。空气样本(Air filter)与粪便样本(Feces)中病毒检出,高度相关,说明粪便排毒可能是导致空气传播ASFV的主要因素。如下图3所示。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图3:中等毒力马耳他毒株咽拭子、粪便、上方空气病毒检测结果

 

注:OPF-咽拭子、Feces-粪便、Air filter-空气样本

 

1.4.3中等毒力毒株荷兰

 

中等毒力荷兰接种后,从第4-30天,空气带毒;咽拭子(OPF)在试验结束依然能能检出病毒。空气样本(Air filter)与粪便样本(Feces)中病毒检出,如马耳他毒株一样,呈高度相关。如下图4所示。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图4:中等毒力荷兰毒株咽拭子、粪便、上方空气病毒检测结果

 

注:OPF-咽拭子、Feces-粪便、Air filter-空气样本

 

1.5结论

 

高毒力和中等毒力的ASFV在感染猪上方空气和出口均能检测到;空气中病毒与粪便排毒呈高度相关。

 

二、Ann Sofifie Olesen等科学家证明空气接触可以感染

 

Ann Sofifie Olesen等科学家使用波兰毒株ASFV(POL/2015/Podlaskie/Lind-holm)对猪进行鼻内接种,让阴性猪直接(猪圈内和猪圈之间的接触)或通过空气接触病毒感染猪。结果显示:在圈内、圈间和空气接触的猪都感染了病毒,空气样本中也检测到了ASFV DNA。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图5:非洲猪瘟病毒由受感染猪通过直接接触和气溶胶途径传播

 

2.1病毒接种

 

试验组(1-4号和23-26号)鼻内接种4 log10 TCID50每2mL的病毒。其他猪不接种病毒。

 

2.2直接接触与空气接触设置

 

鼻内接种猪:1-4,23-26,放置于Pen1,黑色圆点;

 

直接接触猪:5-8,27-30,放置于Pen1,白色方形;

 

间接接触猪:9-12,31-34,放置于Pen2,黑色菱形;

 

空气接触猪:13-16,35-40,放置于Pen,白点和灰点;

 

阴性对照猪:17-22,41-44,放置于Pen5,黑色方形和灰色方形;

 

具体放置如下图6所示:

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图6:试验猪分组及空间位置

 

2.3试验结果:

 

2.3.1.直接接触组和间接接触组猪只血液均可检测到病毒,如下图7-8所示。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图7:直接接触猪血液病毒滴度

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图8:间接接触猪血液病毒滴度

 

2.3.2 空气接触组:

 

试验开始的第8天,有猪只血液中检测到病毒,整个试验进行期间,编号为13、14、15、35、36、37、39、40的猪血液检测到病毒,编号为16、38实验猪血液中没有检测到病毒,如下图9所示。

 

空气可以传播非洲猪瘟病毒,在空气中的带毒与粪便排毒相关

图9:空气接触猪血液中病毒滴度

 

2.4试验结论:

 

ASFV可以通过空气传播感染阴性猪。

 

三、总结:

 

上述两篇文献的结论均证实非洲猪瘟可以通过空气传播,H.C. de Carvalho Ferreira研究数据还表明:空气中ASFV与粪便排毒相关。目前证实能通过空气传播ASFV的文献较少,需要更多文献进行佐证;临床上猪场进行非瘟防控时,除了考虑病毒的接触传播外,还需要考虑空气传播途径。

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