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一、绪论
九十年代后期，一种和先前猪圆环病毒污染的PK-15细胞培养物不同的猪圆环病毒在北美和欧洲被检出。那个时候，原来的细胞培养物污染病毒被命名为PCV1，于是新的致病性病毒被命名为PCV2。最近，一种新的猪圆环病毒被命名为PCV3。到目前为止，仅有PCV-2被明确证实能够引发疾病，术语猪圆环病PCVD被用于描述与PCV2相关的疾病和症状。猪圆环病可能表现为不同的临床表现，概括在表1中。
表1 现在认知的猪圆环病，PCV2相关疾病概述
二、病原学
PCV-2属于圆环病毒科圆环病毒属。它是一种无囊膜病毒，直径12-23纳米，由1767-1768个核苷酸组成的环状、共价封闭的单链DNA(ssDNA)基因组组成，被单一蛋白形成的衣壳所包裹。
PCV感染细胞后，单链DNA被转化为双链DNA(dsDNA)中间体，又称复制形式(RF)。RF是双义的，由病毒链(阳性)和互补链(阴性)编码的基因组成。PCV-2基因分布在11个推定的开放阅读框(ORF)中，但只有4个基因能够表达蛋白(表2)(图1)。
表2 能表达PCV2蛋白的开放阅读框
图1 PCV-2 基因组和四种ORF 编码蛋白示意图
PCV-2基因组分析显示，全球PCV-2毒株中毒株具有密切的系统发育关系，核苷酸序列一致性超过93%。基于配对序列对比(PASC)的PCV-2基因型定义是在2008年提出的，目前已有6种基因型(PCV-2a、PCV-2b、PCV-2c、PCV-2d、PCV-2e和PCV-2f)的文献记载，其中从“a”到“d”的基因型已被充分研究和分类。然而，自2008年以来，PCV-2序列的报道数量不断增加，显然基于配对序列对比阈值的PCV-2基因分型方法并不适用于所有的PCV-2毒株，需要一种新的PCV-2基因分型方法:
1.1996年至2000年后数年之间，PCV-2a是临床感染猪中最常见的基因型，之后PCV-2b占主导地位(“基因型转移”)。
2.PCV-2b在世界范围内的出现与一种更严重的临床疾病的出现有关。
3.PCV-2d(也被一些研究小组称为突变型PCV-2b)在中国首次报道，目前可能在全球范围内发生第二次“基因型转移”(从PCV-2b到PCV-2d)。
4.在丹麦的历史病料中，巴西的野猪和中国的家猪中都检测到了PCV-2c。
5.最近，在北美采集的猪样本中发现了PCV-2e，在中国也发现了PCV-2f。
6.PCV-2c、PCV-2e、PCV-2f的临床意义目前尚不清楚。
重要的是，由于PCV-2是一种具有高核苷酸取代率(可与RNA病毒相媲美)的ssDNA病毒，而且产生基因组突变的可能性很高，因此在未来出现新的基因型是可以预期的。此外，重组毒株也在猪群中传播。
PCV-2基因型之间存在一定的抗原变异。然而，尽管存在基因型和抗原差异，人们认为PCV-2是作为一个单一血清型存在的。
PCV-2是一种抵抗性强的病毒，因为它在56°C灭活1小时或75°C下灭活15分钟仍可存活。在室温下，将PCV-2暴露于一些商用消毒剂(双氯苯双胍己烷、甲醛、碘、氧化剂和醇)下(10分钟至24小时)，可导致病毒滴度显著下降。
三、流行病学
PCV-2在家猪和野猪中普遍存在。除小鼠和大鼠外，非猪种动物对PCV-2没有易感性。
口鼻接触是传播的主要途径，但PCV-2病毒已在鼻腔、扁桃体、支气管和眼部分泌物、粪便、唾液、尿液、初乳、常乳和精液中发现。猪可以通过食用有病毒污染的动物生组织而被感染。通过对分娩前3 周的怀孕母猪鼻内接种PCV-2 证实了经胎盘感染。用被PCV-2人工污染的精液配种的阴性母猪发生繁殖障碍，胎儿被感染。然而，普遍认为公猪感染PCV-2后精液排毒，其PCV-2病毒数量不足以感染母猪或其胎儿。因此，感染公猪的精液进行人工授精不被认为是PCV-2 的一个传播途径。
PCV-2 在猪之间的传播可以通过将易感动物与已感染的动物混群而发生。直接接触比在不同围栏中的动物之间传播更有效。量化血清、鼻腔分泌物和粪便中PCV-2的纵向研究发现，大多数猪在4~11周龄时被感染，具体取决于猪场情况。不同比例的母猪和仔猪在哺乳期可能出现PCV-2病毒血症，这表明母猪有可能通过呼吸道分泌物、初乳和乳汁把PCV-2传给哺乳仔猪。
PCV-2在个体或猪群中的持续性感染尚未得到广泛研究，但在接种病毒125天后实验猪组织中检测到病毒。在田间条件下，在猪血清持续检测到PCV-2DNA的时间长达22周。在7~70日龄的猪的血清中反复发现PCV-2 DNA，进一步证明尽管存在高水平的PCV-2 特异性抗体，一些猪只仍然被持续感染。
四、导致呼吸道疾病的PCV-2感染的临床症状和病变
存在的几种圆环病表现形式，只有猪圆环病毒2型系统性疾病真正能够引起明显的呼吸系统疾病，并且可能是圆环病的主要表现形式之一。事实上，这样的情况是两大问题的结果：
首先，PCV-2是一种可以全身性复制的病毒，包括肺。
其次，猪圆环病毒2型系统性疾病的特点是导致免疫系统严重受损，临床症状和病变往往是混合感染在不同器官协同作用的结果。
因此，猪圆环病毒2型系统性疾病是一种多因素疾病，其中PCV-2 感染是必要条件，但呼吸道临床症状也受到其他病原体的影响。
由于PCV-2无处不在，大多数PCV-2感染是亚临床的。在田间，感染PCV-2的猪的比例及其病毒载量从哺乳期开始逐渐增加，与母源免疫力下降相同步。只有一小部分感染PCV-2的猪会出现猪圆环病毒2型系统性疾病，通常发在2~4个月大的猪只。与亚临床感染的猪相比，这个阶段临床感染的猪血清中的病毒浓度更高，排毒水平更高，抗体反应更弱。感染猪场的发病率通常为4%~30%（偶尔为50%~60%），死亡率为4%~20%。
猪圆环病毒2型系统性疾病的临床特征是消瘦（图2）、皮肤苍白、呼吸窘迫（呼吸急促）、腹泻，偶尔还会出现黄疸。皮下淋巴结肿大是猪圆环病毒2型系统性疾病早期临床症状的共同特征。
图2 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪，注意突出的背脊是体况损失的标志
猪圆环病毒2型系统性疾病病变主要见于淋巴组织，淋巴结肿大是猪圆环病毒2型系统性疾病早期临床阶段最突出的特征（图3）。正常大小，甚至萎缩的淋巴结通常出现在猪圆环病毒2型系统性疾病的更晚期阶段，而患病猪的胸腺经常萎缩。受猪圆环病毒2型系统性疾病影响的猪的特征性组织病理学淋巴病变包括淋巴细胞减少，巨嗜细胞和巨型多核细胞浸润（图4）。皮质萎缩是胸腺的一个突出现象。在组织细胞或树突状细胞中可能发现细胞质病毒包涵体（图5）。
肺可能扩大，未塌陷，呈橡胶状坚韧，呈弥漫性或斑片状分布，伴有充满液体的小叶间隔（图6）。这些发现与显微镜下的间质性肺炎相对应，肺泡间隔增厚，肺细胞II 型增生，肺泡空间中存在巨噬细胞和少量中性粒细胞（图7）。在最严重的情况下，肺泡内可见炎性坏死细胞团块；术语增殖性坏死性肺炎用于指代这些病例（图8）。支气管周围纤维化和纤维性细支气管炎发生在晚期病例中。
图3 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；肠系膜淋巴结。淋巴结肿大是主要的特征之一。还要注意在这种情况下淋巴结发红，可能与淋巴结实质坏死有关。
图4 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；气管支气管淋巴结。严重的淋巴细胞耗竭导致淋巴细胞缺乏和肉芽肿性炎症导致淋巴结实质充满了嗜酸性粒细胞。苏木精和伊红染色。
图5 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；支气管淋巴结。PCV-2胞质内包涵体大量出现，呈圆形两亲性、黑色结构，葡萄串状。苏木精和伊红染色。
图6 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪肺。明显没有肺塌陷和肺部扩张，具有不规则的小叶模式（棕褐色斑驳）。轻度间质水肿。
图7 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；肺。典型间质性肺炎，肺泡腔内有大量巨噬细胞。苏木精和伊红染色。
图8 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；肺。典型增殖性坏死性肺炎，2型肺细胞显著肥大和增生，肺泡内有坏死细胞群。苏木精和伊红染色。
猪圆环病毒2型系统性疾病的其他病变可在肝脏中发现（扩大或萎缩、苍白且坚硬），肝脏病变是黄疸的原因。一些猪的肾皮质出现与单核间质性肾炎相对应的白点。在猪圆环病毒2型系统性疾病的严重病例中，几乎所有器官和组织都可能出现淋巴组织细胞炎症。
五、诊断
如果满足以下标准，则可以确认猪或猪群中存在猪圆环病毒2型系统性疾病：
生长迟缓和消瘦，经常伴有呼吸困难和腹股沟淋巴结肿大，偶尔伴有黄疸。
淋巴组织中的中度至重度特征性组织病理学病变。
感染猪的淋巴和其他组织的病灶内有中量到大量的 PCV-2病毒。
该病例定义不排除同时存在其他疾病，它们和猪圆环病毒2型系统性疾病的混合感染非常常见。在疑似感染猪圆环病毒2型系统性疾病的猪中观察到的临床症状和严重损伤均不足以诊断该疾病。特别是，猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 感染导致的呼吸道症状以及所有能够导致消瘦的疾病和病症（表3）必须与猪圆环病毒2型系统性疾病区分开来。
猪圆环病毒2型系统性疾病的群体诊断是基于临床过程的发生，其主要特征是消瘦和死亡率超过农场的预期和/或历史水平，以及基于上述症状的猪圆环病毒2型系统性疾病个体诊断在一些猪只中的反复确认。这一诊断标准在PCV-2流行的情况下非常有用，但随着猪圆环病毒2型系统性疾病演变为更慢性、更温和、死亡率更低的形式，在猪圆环病毒2型系统性疾病疑似并有效使用PCV-2疫苗的猪场确诊此病并非易事。
已经开发了几种方法来检测组织中的PCV-2。原位杂交(ISH)和免疫组织化学(IHC) 是诊断猪圆环病毒2型系统性疾病最广泛使用的方法。
PCV-2核酸或抗原通常存在于组织细胞、多核巨嗜细胞和其他单核/巨噬细胞，以及包括呼吸道上皮细胞在内的其他细胞的细胞质中（图9）。
表3 消瘦的鉴别诊断（作为与猪圆环病毒2型系统性疾病相关的主要临床体征）及其病因；标有星号的条件也可能是猪呼吸道疾病综合征的一部分。
图9 猪圆环病毒2型系统性疾病感染的猪；肺。患间质性肺炎的肺间质中巨噬细胞样细胞中的PCV-2 基因组。原位杂交检测PCV-2；快速绿色复染剂。
已经观察到组织中PCV-2 病毒载量与猪圆环病毒2型系统性疾病中显微镜下淋巴病变的严重程度之间存在很强的相关性。由于受损组织中PCV-2 病毒载量是猪圆环病毒2型系统性疾病感染猪和PCV-2亚临床感染猪之间的主要区别，因此对组织和/或血清中PCV-2病毒定量的技术可能用于诊断猪圆环病毒2型系统性疾病。然而，虽然定量聚合酶链反应(PCR) 显示出在群体水平上诊断猪圆环病毒2型系统性疾病的潜力，但需要结合组织病理学和组织中PCV-2 的检测来进行单个猪上的猪圆环病毒2型系统性疾病。定性PCR 技术不应用于诊断猪圆环病毒2型系统性疾病，因为该病毒无处不在，阳性结果中没有临床症状案例很常见。
已经开发了用于检测PCV-2 抗体的血清学检测方法，但使用血清学技术诊断猪圆环病毒2型系统性疾病存在问题，因为PCV-2 无处不在，并且在感染和未感染猪场中其血清转阳的模式基本是一样的。
六、预防和控制
猪圆环病毒2型系统性疾病是一种多因素疾病，可以通过使用PCV-2疫苗进行控制。然而，在疫苗问世之前，预防和控制的重点是消除被认为会激发该病的环境和传染性辅助因素（例如Madec的20点计划）。自2000年代中期以来，商业PCV-2 疫苗已经上市，猪圆环病造成的经济损失（包括亚临床PCV-2 感染）已显著减少。重要的是，由于猪圆环病毒2型系统性疾病病例中通常存在混合感染，因此针对PCV-2的疫苗接种明显有助于控制与多种微生物感染相关的临床疾病。
母猪和仔猪的同时接种已被证明有利于猪圆环病毒2型系统性疾病的持续控制。母猪疫苗接种有两个潜在目标：
预防仔猪发生猪圆环病毒2型系统性疾病。
预防母猪发生猪圆环病毒2型系统性疾病。
为预防仔猪发生猪圆环病毒2型系统性疾病和包括呼吸道疾病在内的并发疾病，应对妊娠后期母猪进行疫苗接种。母猪分娩时感染PCV-2和/或PCV-2抗体水平低下会增加仔猪发生猪圆环病毒2型系统性疾病后的总体死亡率。提高母源免疫力和减少分娩时母猪病毒血症的措施应该会降低问题猪群仔猪死亡率。
在感染猪场中控制猪圆环病毒2型系统性疾病，仔猪免疫比母猪免疫起效更快，因为给仔猪接种疫苗会在有患病风险的猪只中产生保护性免疫。产生抗体低，甚至疫苗接种后没有检测到抗体，并不一定表明缺乏保护。
细胞免疫也被认为对保护很重要。通过证明在接种了PCV-2亚单位疫苗的仔猪中产生了PCV-2特异性IFN-γ分泌细胞揭示细胞免疫的重要性。
七、PCV-2 对猪呼吸道疾病综合征的贡献
几年前，有人提出存在与PCV-2相关的呼吸道疾病，与猪圆环病毒2型系统性疾病的发生无关。事实上，这种病毒与其他病原体以及称为增殖性和坏死性肺炎的特定病理状况一起存在于猪呼吸道疾病综合征病例中。一些作者提出PCV-2相关的猪呼吸道疾病综合征（在文献中也称为PCV-2-肺病或PCV-2-呼吸系统疾病）应根据临床症状和组织病理学标准与猪圆环病毒2型系统性疾病相鉴别。然而，其他人提出了猪圆环病毒2型系统性疾病和PCV-2-肺病之间潜在的诊断重叠，因为在全身性疾病病例中很容易出现呼吸道临床症状。
它们的差别，即使猪场兽医有经验，必须依赖于组织病理学和不仅仅是肺的检查，也包括淋巴组织的检查。真实的PCV-2-肺病病例应显示PCV-2相关的呼吸道病变，但没有猪圆环病毒2型系统性疾病的微观病变。考虑到猪呼吸道疾病综合征不是一种特定的疾病，而是根据临床症状诊断的病症，PCV-2对其的参与可能会导致诊断的复杂性，包括猪呼吸道疾病综合征的临床评估和PCV-2-肺病的实验室确认，或猪圆环病毒2型系统性疾病（加上其他呼吸道/全身病原体）。
一项研究试图区分在没有猪圆环病毒2型系统性疾病的情况下PCV-2可能导致猪呼吸道疾病综合征的频率。在这项研究中，大多数临床诊断为猪呼吸道疾病综合征并伴有PCV-2感染的猪在组织病理学上被诊断为猪圆环病毒2型系统性疾病。当没有诊断出猪圆环病毒2型系统性疾病并且在猪体内检测到PCV-2（总是少量）时，病毒也在淋巴组织中被系统地检测到，在某些情况下，在肺中也是如此。根据诊断PCV-2-肺病的要求，PCV-2存在于肺中而不存在于淋巴组织中的情况在任何情况下都没有发生。此外，尽管在所研究的病例中可以检测到伴随的病毒或细菌因子（可能使临床和病理结果恶化），但在肺部检测到的PCV-2量从未高于在淋巴病变中检测到的量。事实上，在这些猪呼吸道疾病综合征、非猪圆环病毒2型系统性疾病、PCV-2感染的猪中获得的结果表明PCV-2 全身感染可以解释为：
亚临床 PCV-2 全身感染，其他病原体是猪呼吸道疾病综合征的主要贡献者。
或者从猪圆环病毒2型系统性疾病临床症状恢复阶段（无淋巴显微病变），伴有肺部病变，有或没有其他病原体。
考虑到现有数据，PCV-2是全球范围内猪呼吸道疾病综合征病例中涉及的主要呼吸道病原体之一，当时没有或未进行疫苗接种。从诊断的角度来看，PCV-2-肺病和猪圆环病毒2型系统性疾病之间所谓的重叠可以忽略不计。
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