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堆肥法处理PEDV感染猪只尸体的有效性

猪场生物安全及猪病预防管理 2022-03-07

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PEDV是一种严重威胁猪群健康和生产的肠道疾病。已经进行了大量研究,以评估病毒在车辆和设备表面、饲料和饮水、建筑物表面的生存能力,但对PEDV感染尸体的持久性和有效的处理方法知之甚少。

背景:PEDV是一种严重威胁猪群健康和生产的肠道疾病。已经进行了大量研究,以评估病毒在车辆和设备表面、饲料和饮水、建筑物表面的生存能力,但对PEDV感染尸体的持久性和有效的处理方法知之甚少。本研究通过qRT-PCR,在不同时间--温度组合下,使用堆肥法处理感染PEDV仔猪的尸体,对PEDV RNA的持久性进行定量分析。虽然这种方法不能区分病毒是否具有传染性,但它是一种快速、灵敏的检测方法,可用于评估病毒基因组。

 

结果:在第一项研究中,PEDV含量1×105 TCID50/ml,不同时间--温度组合包括:处理温度--37℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃;处理时间--0天、1天、2天、3天、4天、5天、7天、14天。在所有温度下,病毒RNA拷贝数随着时间的推移而下降,在65℃和70℃时下降最明显和迅速。在最极端的条件下,3个样本中的2个在70℃条件下处理14天后无法检测到病毒RNA。在第二项研究中,对感染PEDV仔猪的尸体进行了两个循环的堆肥,分别持续36天和37天,总堆肥时间为73天。堆肥是在生物安全、条件可控的房间内进行,使用的是连续料堆堆肥隔热箱。第一个循环第26天温度达到35-57℃,第二个循环第3天温度达到35-45℃。在每个料堆的10个位置采样检测,没有检测到病毒RNA。

 

结论:堆肥法似乎是一种有效处理PEDV感染仔猪尸体的方法。堆肥循环的时间和高温的结合有效地降解了细胞培养基中的病毒RNA,在一个36天的堆肥循环后,尽管软组织没有完全分解,但从料堆上收集的样品通过RT-PCR无法检测到PEDV RNA。

 

表1:时间--温度试验结果中,qRT-PCR检测结果。

 

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图1:平均量化周期和RNA浓度随处理时间的变化

 

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图2:在堆肥循环1中,手工记录堆肥堆料部分平均温度

 

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图3:在堆肥循环2中,手工记录堆肥堆料部分平均温度

 

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图4:PEDV标准核酸靶向记录

 

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图5:对数稀释法培养PEDV细胞

 

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图6:堆肥料堆箱设计

 

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图7:堆肥料堆结构、温度监测位置、堆肥取样位置

 

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