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伪狂犬病是由伪狂犬病毒（Pseudorabies，PRV）引起的多种动物共患的急性、热性传染病，世界动物卫生组织（OIE）将其列入OIE疫病名录，我国动物检疫中被列为二类动物疫病，2012年我国将猪伪狂犬病列为优先防治的动物疫病病种之一。伪狂犬病毒可引起母猪出现返情、屡配不孕，妊娠母猪流产、产死胎和木乃伊胎；仔猪出现呼吸道症状和神经症状，病死率达20%~100%；育肥猪表现轻微的呼吸道症状，饲料利用率降低，增重减慢；公猪常表现睾丸炎，种用价值下降。而且有报告证明疑似感染PRV人群分离出PRV毒株，而且直接表明PRV可跨宿主感染人。
目前，有两种途径来预防和控制猪伪狂犬病。一是用疫苗免疫猪群，二是提高猪场生物安全水平，清除病原，切断传播途径。生物安全防控具有低投入高回报的优势。但生物安全的实施需要深入了解病原生物学特性。因此，Gong等详细研究并阐述了不同物理和化学因子对PRV活力的影响，为我们猪场生物安全防控应用提供参考。
01 温度对PRV病毒活力的影响
温度在48-55℃之间，伪狂犬病毒感染力快速下降，温度达到70℃以上时，几秒钟可灭活伪狂犬病毒。
图1 稀释后病毒倒入8个PCR管，每管50 µL，用PCR仪设置热处理温度和时间。热处理温度范围为40℃-80℃，共23个温度梯度。热处理为0-1200s，共23个梯度。每个样品于每个温度和时间点重复检测3次。热处理后，每管加入50 µLDMEM，混匀后，每管内容物接种于含单层PK-15细胞的96孔板中，接种病毒42h后观察并记录细胞病变情况。时间点设置为病毒在给定温度下100%失活且无任何细胞病变的时间。
02 温度对PRV病毒活力的影响
PRV在PH值6-9之间比较稳定，当PH＜4或PH＞11时，PRV能在10分钟内快速失去感染力。
图2 在PH=3、PH=4、PH=5、PH=6、PH=9、PH=10和PH=11观察PRV（K）（A图）和PRV（B）（B图）活性，处理时间为0、10、20和30min。试验在25-30℃室温条件下开展，每个试验组重复3次，取平均值。
03 紫外线对PRV病毒活力的影响
紫外线C波段能杀灭PRV，而A波段和B波段不能杀灭。紫外照射强度越强，时间越长，杀灭PRV效果越好。270 µW/cm2照射7分钟可完全灭活PRV。
图3 A图：UVC平均强度为135µW/cm2。B图：UVC平均强度为270µW/cm2。C图：非C波段紫外线。紫外照射在约为26℃和无通风的生物安全罩中开展，环境UVC平均强度为135µW/cm2或270µW/cm2，处理时间为0,、1、3、5、7、9、12和15min。环境中非C波段紫外照射，处理时间为0、5、15、35、60、90、120、150和180min。每个试验组病毒滴度用TCID50方法检测。
04 湿度对PRV病毒活力的影响
PRV活力受环境湿度影响较大，在潮湿环境中PRV能存活较长时间。快速干燥时PRV存活24~36h，自然干燥时PRV存活6天左右，封闭潮湿时PRV存活长达14天。
图4 风扇调至最大风速将培养皿快速风干或在26℃生物安全罩中自然干燥。PRV培养基作为对照。每个试验组病毒滴度用TCID50方法检测。试验重复3次。
05 冻融对PRV病毒活力的影响
反复冻融对PRV活性影响较小，在-80℃冷冻，20℃和37℃条件下溶解均不显著影响PRV活性。
图5 20℃和37℃代表溶解温度，冷冻温度为-80℃。横坐标为冻融次数，以此检测冻融1、5、10、15、20、25、30、35、40次的病毒滴度。
06 不同储存条件对PRV病毒活力的影响
短期储存对PRV活性影响较小，长期储存对PRV活性影响较大。26℃时，PRV可储存20~35天。储存温度在-20摄氏度至-80℃之间，PRV保存高滴度超过60天。
图6 A图：PRV（B），B图：PRV（K）。PRV稀释液倒入1.5mEP管，每管2000µL，分别储存于26℃、4℃、-20℃或-80℃。根据试验时间点取样检测病毒滴度，绘制滴度曲线。试验重复3次。
07 光线对PRV病毒活力的影响
在环境平均温度38.16℃，桌面平均温度42℃时，光线直射能在10分钟左右影响PRV活力。因此，在同等温度条件下，光照可杀灭PRV。
表1 光线对PRV病毒活力的影响
08 化学消毒剂对PRV病毒活力的影响
大部分化学消毒剂对PRV都有较好的杀灭作用，其中，离子表面活性剂和强氧化剂效果最佳。
表2 化学消毒剂对PRV活力的影响
注：“B”代表PRV（B），“K”代表PRV（K）
黄色代表PK-15细胞被消毒剂杀灭而检测不到；绿色代表接种PK15细胞后存活未见PRV细胞病变；红色代表接种PK-15细胞后出现PRV细胞病变。
SDIC：二氯异氰脲酸钠；SDS：十二烷基苯磺酸钠
