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蓝耳病毒、圆环病毒经常混合感染，造成母猪流产死胎率高、仔猪死亡率大，蓝耳苗+圆环苗混合注射，联合免疫，一针防两病，效果更好。
猪场疾病主要分为三大类：一是繁殖障碍类疾病，二是消化道类疾病，三是呼吸道类疾病，猪病中蓝耳病和圆环病均与这三类疾病密切关联，因此蓝耳圆环被称为猪场疾病的底色病。二者狼狈为奸的关系，无论从作用机理，还是发病症状表现，还是导致免疫抑制方面，都有许多的共同点。比如二者均会引起母猪繁殖障碍，表现母猪流产、产死胎，同时引起不同阶段育肥猪的呼吸道问题，表现咳喘和消瘦。蓝耳病毒和圆环病毒在猪场的检出率非常高，据报道2021年病猪中蓝耳检出率为51.37％，圆环检出率为39.16％（图1）。蓝耳圆环的混合感染、甚至继发细菌病，在临床防控中一直是比较棘手的问题，下面就结合临床案例谈谈此类疾病的有效防控措施。
图1 2018-2021年猪常见呼吸道疾病流行病学调查结果
01猪场背景
Background Of Pig Farm
该场于2022年1月份母猪出现流产，1-4月份月均流产11头。场内统计月均死胎数314头，月均弱仔数326头，月均木乃伊胎65头，以上指标均明显高于往月。保育猪60-70日龄也出现蓝耳波动，表现为：体温39.5℃-41.5℃，泪斑、厌食、咳嗽、喘气比例增多，被毛粗乱，渐进性消瘦、腹股沟淋巴结肿大，僵猪增多。
该场发病前使用GDr180株高致病性蓝耳弱毒苗，再加上当时天气寒冷，气温变化大或为诱因。发病后用替米考星和泰万菌素配合磺胺压制，效果仍不理想，保育猪死淘率仍在13.8％-15.7％范围。发病期各阶段猪群表现见图2。
图2 发病期各阶段猪群表现
02剖检病变
Pathological Changes In Autopsy
剖检5头仔猪发现病变主要集中在肺部感染，刚发病猪主要表现肺脏有出血、间质增宽。病程较长的猪小肠段细如鸡肠，绒毛心，胸腔有大量淡黄色液体蓄积，肺脏纤维素样渗出（图3）。
图3 发病初期和后期猪剖检图片
03实验室病原检测
Laboratory Pathogen Det
为了进一步确诊，随机采样脐带血和睾丸阉割液21份检测蓝耳和圆环病毒2型。结果为PCV-2阳性率为85.7%（18/21）（图4），说明圆环病毒的垂直感染比较严重。
图4 脐带血和睾丸阉割液检测PCV-2阳性
又采集保育发病仔猪组织病料2份。送实验室分别检测蓝耳、伪狂犬和圆环2型和3型病毒。检测结果显示：伪狂犬病毒和圆环病毒3型均为阴性，蓝耳病毒和圆环病毒2型为阳性（图5）。
图5 2份保育病毒蓝耳和圆环病毒2型为阳性
图注：1-2号为蓝耳检测样品，1号阳性，2号阴性；3-4号为圆环2型检测样品，均为阳性；5-6号为圆环3型检测样品，均为阴性；7-8号为伪狂犬检测样品，均为阴性；泳道M为D2000 DNA Marker。
将阳性样本经蓝耳ORF5基因扩增测序，依据ORF5基因推导编码的氨基酸构建的同源性分析，该场毒株为类高致病性蓝耳毒株，该场蓝耳毒株测序结果、同源性比对和进化树分析见图6和图7。
图6 该场蓝耳毒株测序和同源性对比分析
图7 该场蓝耳毒株进化树亲缘关系分析
04免疫方案
Immunization Programme
通过检测分析该场同时存在蓝耳和圆环的混合感染，经过同场内沟通从源头开始，种猪群采用兰立定+圆立定混合免疫方案，每次兰立定2ml+圆立定1ml混合，间隔2周二免。仔猪也采用圆兰混注紧急免疫方式：兰立定1ml+圆立定1ml（图8）。
图8 免疫前准备工作
种猪群第一次普免时间：5月10日；
种猪群第二次普免时间：5月24日；
产房仔猪和保育猪开始免疫时间：5月10日。
考虑到仔猪疑似副猪嗜血杆菌比较严重，按照某知名厂家推荐的用药方案：20%替米考星+75%复方磺胺氯达嗪钠粉+黄芪多糖连续给药2周来控制继发感染，持续发热、萎靡不振，减料、不食的仔猪肌注头孢噻呋混悬液。
后续免疫方案调整：母猪圆兰混注两次普免后出生的仔猪按照14日龄圆兰混注2ml，28-35日龄圆兰混注2ml的常规程序执行。
05效果跟踪
Effect Tracking
免疫方案实施三个月后该场再次采样检测PRRSV和PCV-2。荧光定量PCR和普通PCR检测显示母猪和保育猪PRRSV均为阴性，保育猪PCV-2均为阴性（图9和图10），表明通过圆兰混合免疫蓝耳和圆环活跃度下降。
图9 PRRSV检测结果
图10 PCV-2检测结果
圆兰混注实施4个月时间，生产报表统计分析表明母猪窝均健仔数由9.2头提升至12.9头，产房成活率由91.6％提高至95.3％，保育成活率由92.1％提高至到97.7％。随着蓝耳圆环活跃度的下降，多项生产成绩指标明显提升（表1、图11-13）。
表1 圆兰混注方案实施后三项生产指标统计表
图11 圆兰混注方案实施后5-9月份窝均健仔数
图12 圆兰混注方案实施后5-9月份产房成活率
图13 圆兰混注方案实施后5-9月份保育成活率
06小结和讨论
Summary And Discussion
在我国猪场，PRRSV和PCV-2共感染情况相对比较普遍，两者共感染时可以促进PRRSV的增殖，延长病毒血症的持续时间。共感染也可以促PCV-2的复制，增加其在血清中的病毒载量。据文献报道PRRSV和PCV-2共感染组血清、组织中PRRSV的载量均显著高于PRRSV单感染组，PCV2的载量均显著高于PCV2单感染组；共感染组猪临床症状比起PRRSV或PCV-2单感染组更严重。
众多文献报道蓝耳活疫苗已被证实散毒、排毒、毒力返强、重组变异，特别是疫苗毒与野毒、不同的疫苗毒间重组从未间断。因此蓝耳活苗特别是高致病性活苗的安全性一直备受争议，再加上临床使用中多次出问题，直接高致病蓝耳活苗批签发量大幅度下降。据了解，该场已免疫高致病性蓝耳弱毒苗近两年，本次类高致病性蓝耳毒株波动不但导致流产增加、死胎、弱仔和仔猪死亡率也明显增加，经济损失巨大，由此可见毒力较强。通过圆兰混注方案贯彻实施，前期大群紧急免疫，接续常规免疫快速降低死淘率，生产成绩提升提高。
常规蓝耳活疫苗，既不能实现猪场持续的稳定，更没办法实现PRRSV净化。浙江美保龙生物生产的新型蓝耳病灭活苗“兰立定”不但安全，而且有效。最大的特点通过抗原交叉呈递技术同时启动细胞免疫和体液免疫，快速降低猪群PRRSV载量，有效阻断蓝耳病毒的垂直传播和水平传播。同时配合国内第一家微载体悬浮培养工艺生产的圆环疫苗“圆立定”，能有效同时防控蓝耳和圆环。由于“兰立定”和“圆立定”佐剂相同，可实现混合免疫，这就大大降低了免疫应激次数、减轻了免疫工作量。目前圆兰混注方案经过近一年的推广，很受广大猪场欢迎。
本案例再次证明灭活苗“兰立定”对类高致病性蓝耳毒株引起的猪群波动，能做到快速控制，提高生产成绩，安全有效。对于同时存在圆环病毒感染的情况，采用“兰立定”和“圆立定”混合免疫方案，一针双防，效果更佳，蓝耳圆环联合免疫策略能帮助越来越多的规模猪场实现增效降本，效益倍增。（作者简介：欧阳昀 华南农业大学预防兽医学硕士，师从张桂红教授，十年规模猪场疫病防控和临床兽医服务经验 审校：於庆雄 娄昆鹏 联系我们：TD@mebolo.com）
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