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两种方法检测猪O型、A型口蹄疫免疫抗体的对比试验

中农威特 2022-03-18

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口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种烈性、急性、热性、接触性传染病,被世界动物卫生组织OIE列为必须报告的传染病。在世界上许多国家或地区都有发生和流行,对养殖业及相关行业造成了严重的经济损失。

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种烈性、急性、热性、接触性传染病,被世界动物卫生组织OIE列为必须报告的传染病。在世界上许多国家或地区都有发生和流行,对养殖业及相关行业造成了严重的经济损失。

 

我国通过实施强制免疫来防控口蹄疫,免疫后产生的抗体水平是评价疫苗质量和免疫效果的重要手段,也是制定合理免疫程序的科学依据。对于免疫抗体检测,常因检测方法不同而使结果存在一定偏差,因此选择准确可靠的检测方法是科学评价免疫质量的基础。

 

本试验通过使用口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒和口蹄疫病毒抗体ELISA检测试剂盒(VP1结构蛋白亚单位ELISA)对口蹄疫O型、A型免疫抗体进行检测并做对比分析。

 

一、检测方法

 

1、液相阻断ELISA

 

目前,国际粮农组织(FAO)、世界动物卫生组织、国家农业农村部等权威机构推荐液相阻断ELISA来对口蹄疫免疫效果进行评价。硏究表明口蹄疫液相阻断ELISA抗体检测技术具有良好的敏感性和可重复性,并与攻毒保护有很好的相关性,现广泛被应用于口蹄疫免疫抗体水平的监测。此方法针对检测口蹄疫全病毒灭活疫苗抗体,因为完整病毒粒子含有多个抗原位点,只有通过多种抗体定性定量检测,才能真实测定血清中抗体的含量,从而客观反映免疫后机体抗病毒感染的能力。

 

2、口蹄疫病毒抗体ELISA(VP1结构蛋白亚单位ELISA)

 

口蹄疫病毒(FMDV)O/A型抗体ELISA检测试剂盒采用固相阻断ELISA方法,根据中和表位在VP1蛋白的siteA(141-160)设计而成,用于检测结构蛋白抗体。通过ELISA方法检测FMDV结构蛋白抗体,不仅敏感性高、血清型特异性强,适用于大规模样本检测,而且还具有快速、易于操作、结果稳定的优点,但该方法受到疫苗毒株的影响,针对不同疫苗,抗体检测结果存在不同程度的差异性。 

 

二、样本背景

 

某养殖场提供30日龄、60日龄、90日龄、120日龄商品猪血清各15份,母猪血清10份,共70份。 

 

三、试验方案

 

应用上述两种方法进行口蹄疫O型、A型免疫抗体检测,同一种方法分初测和复测。

 

四、检测结果

 

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以上结果显示,两种方法O型、A型口蹄疫免疫抗体结果平均符合率分别为77.4%、39.3%。 

 

五、分析与讨论

 

1、根据检测结果,两种方法检测结果存在一定差异性,这主要与两种方法针对抗原类型的不同引起的,全病毒含有多个抗原抗体反应结合位点,而VP1结构蛋白亚单位抗原抗体反应结合位点较单一。

 

2、两种方法O型抗体检测结果符合率远高于A型符合率,不同方法检测引起A型抗体差异大的原因,主要是疫苗毒株与试剂盒选用毒株抗原匹配性不同造成的。

 

3、对于O型抗体,两种方法检测结果符合率为77.4%,两者有较高的对应关系,所以两种方法均可以监测评价口蹄疫O型免疫抗体。

 

4、对于A型抗体,两种方法检测结果符合率为39.3%,两者对应关系不明显,检测结果差异性较大,推荐使用液相阻断ELISA进行口蹄疫A型免疫抗体检测,进而保证检测结果的准确性。


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