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不用采血也能检测猪群抗体,既准确又实用

养猪助手2021-02-10 09:32:29

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猪口腔液指猪口腔中的唾液和血清渗出液组成的混合液体。

一、猪口腔液的介绍

 

猪口腔液指猪口腔中的唾液和血清渗出液组成的混合液体。

 

唾液是由大小唾液腺(大唾液腺包括腮腺、颌下腺和舌下腺;图1)分泌的混合液体,无色无味近于中性(pH 6.6~7.1),其中水分约占99%,其余成分主要是黏液素、淀粉酶、溶菌酶、脂肪酶、富脯氨酸糖蛋白等。血清渗出液是通过口腔黏膜和口腔黏膜上的齿龈沟和毛细血管进入口腔的液体。口腔液具有广泛的生物学功能,口腔液样品可以用于抗体检测和 PCR 检测抗原,一定程度上可替代血清样品,为监测猪群传染病提供一种新的技术手段。

 

图1.猪头部的解剖,其中大唾液腺为7.腮腺、10.舌下腺和30.下颌腺

 

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二、猪口腔液和猪血样作为检测样品的比较

 

使用口腔液的优势:1.采集方便、成本低廉、效率高、可大量采样;二是采样方法简单,采样人员经简单培训即可,易学易用,可快速获取结果,适合国家性或区域性动物疫病根除或净化计划;三是临床采样简单,可行性强,既不会扰乱猪场日常生产性安排和引发动物不良应激,且可连续采样,尤其适用于富含脂肪组织和生性凶猛的生产公猪群。第四.更符合动物福利原则。

 

三、猪口腔液可作为评估猪应激情况和健康状况的的生物标记物

 

口腔液是研究猪应激的最佳液体样品,其中的皮质醇可以作为评估猪应激的标记物。猪群运输、不同环境、不同饲养条件(如不同饲养密度、不同日粮组成、打耳标、采血等)下,猪口腔液中皮质醇不同。另外,口腔液中 IgA、α-淀粉酶活性、IL-18 、嗜铬粒蛋白 A 和急性期蛋白(APP,包括 C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白 A 等)含量增减变化,可以用于猪群应激压力的评估。

 

四、猪口腔液的采集

 

因为猪舍环境条件和检测目标等的不同,猪口腔液的采集方法会有一定差异,同时采集方法、器械、地点和时间等会影响口腔液的组成成分。在此推荐一种猪口腔液的采集方法:将直径1.3cm的全棉绳用于保育猪、直径 1.6 cm的绳子用于生长育肥猪和生产公母猪口腔液采集,用于采集育成猪口腔液的工具如图2所示,悬挂处应远离饲槽和猪排便区。棉绳上端固定,下垂高度与猪只的肩关节齐平(图3),任猪咀嚼,30 min 后收取棉绳(图4),刮取和挤压口腔液至自封袋(图5),然后装入EP管或其它容器。一般认为≥ 1 mL为有效采集量。

 

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图2.用于采集育成猪口腔液的工具(Prickett et al., 2008)

 

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图3.育成猪在咀嚼棉绳(Prickett et al., 2008)

 

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图4.棉绳样品的收集(Prickett et al., 2008)

 

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图5.获得的猪口腔液(Prickett et al., 2008)

 

五、猪口腔液采集注意事项

 

(1) 口腔液检测并非疫病诊断或检测标准程序,仅用于猪群中循环抗体或病原的检测和评估。

 

(2) 单独处理样品,一旦发现抗体或病原,方便回溯研究。

 

(3) 棉绳相较于其它材质绳吸收性最好。

 

(4) 培养猪群啃咬绳子的习惯,方便后续采集。

 

(5) 宜在猪群较为活跃的上午采集样品。

 

(6) 绳子的悬挂高度应与猪肩胛部齐平。

 

(7) 猪有喜新厌旧的心理,已经使用的绳子不宜再用。

 

六、猪口腔液在猪疾病诊断方面的应用

 

在兽医领域,1905年,前苏联最早将马的口腔液用于疾病检测(Blake and Tobin, 1986)。在猪,1976年Corthier首先将猪口腔液用于猪瘟的检测。近十几年来,国内外动物医学界对猪口腔液的研究报道日渐增多和深化,将为猪口腔液在分析、检测等方面的推广应用提供良好的前景。

 

病毒:猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCV)、猪呼吸道冠状病毒、猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒(PRV)、A型流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCDV)、猪瘟病毒(CSF/HC)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、细环病毒1型和2型等的抗体或抗原。

 

细菌或支原体:猪大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪空肠弯曲菌、链球菌、螺旋菌、丹毒丝菌属、胞内劳森氏菌、猪鼻支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体等的抗体或抗原。

 

猪口腔液可以用于早期诊断,某些猪传染病的病毒血症在感染猪出现临床症状前已经存在于猪口腔液中,因此可以比血清样品更早得到结果。

 

口腔液采集样品更方便,如螺旋菌引起的胃溃疡,通常要尸检后方能观察到病变,但可以直接从口腔液中检测到病原。

 

可以通过口腔液检测一些疫苗的有效性,并可用于对口腔液中病原的分子进化特征进行分析。


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