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你了解猪场抗体检测的意义吗?具体来看实验结果

强励豪养猪护理中心2021-03-07 10:20:19

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疫病已经成为制约生猪产业发展的主要瓶颈之一,尤其是猪瘟、蓝耳病 (PRRS)、伪狂犬病 (PRV) 等烈性传染病。近年来,由于多方面的原因,生猪养殖业疫病控制面临严峻的挑战。

导言:

 

疾病是制约生猪产业发展的主要因素之一,近年来,猪病错综复杂,给诊断和防制带来难度,及时开展抗体检测袁可以了解猪场内重大疾病的免疫水平或感染状态,发现疫病风险。本文对江苏省某规模化猪场进行了猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病的血清学系统检测,并对结果进行了分析。

 

疫病已经成为制约生猪产业发展的主要瓶颈之一,尤其是猪瘟、蓝耳病 (PRRS)、伪狂犬病 (PRV) 等烈性传染病。近年来,由于多方面的原因,生猪养殖业疫病控制面临严峻的挑战。猪群的饲养密度越来越大, 猪只的抵抗力逐步降低,导致猪病越来越错综复杂,给诊断和防制带来很多困扰。为了解猪场内重大疾病免疫水平或感染状态,及时发现疫病风险,为重大疫病的预警、防控提供理论依据,更好地指导养猪生产,猪场通常会定期开展抗体检测。本文对江苏省某种猪场进行了猪瘟、蓝耳病、伪狂犬病的血清学系统检测,并对结果进行了分析,现报告如下,供读者参考。

 

1 材料和方法

 

1.1 猪场的选择

 

江苏省某农牧科技有限公司,存栏 1 500 头母猪,实行一点式饲养管理模式,自繁自养,全进全出。仔猪在 3 周龄断奶,断奶当天转入保育舍,10 周龄转培育舍,猪场生产成绩很好,近3 年内没有暴发过烈性传染性疾病。猪场位于江苏常州朱林镇,远离养殖高密度区,自然防疫条件较好。

 

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猪场主要疫苗的免疫程序为:从 2009 年起,一直使用某进口 PRRSV 弱毒疫苗 (VR2332 毒株);进口猪伪狂犬基因缺失疫苗 (Bartha-K61 株);猪瘟高效细胞苗。

 

PRRS 免疫程序:公猪、母猪普免 3 次 / 年,后备母猪在配种前免疫 2 次,仔猪 14 日龄免疫,免疫剂量均为 1 头份 / 次。

 

猪瘟免疫程序:母猪哺乳期跟胎免疫,公猪普免 3次 / 年,后备母猪在配种前免疫 2 次,仔猪 4 周龄、8周龄各免疫 21次,免疫剂量均为 1 头份 / 次。

 

PRV 免疫程序:公猪、母猪普免 3 次 / 年,后备母猪在配种前免疫 2 次,仔猪 9 周龄免疫 1 次,免疫剂量均为 1 头份 / 次。

 

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1.2 采样方案

 

随机采集不同阶段猪只的血液,每个阶段猪只采集5 份血样。血液采集后,分离血清,送相关合作实验室检测,采血方案见表 1。因该猪场为种猪场,公猪的年更新率较高,故本次采集血样公猪的年龄均为 2 年以内的青年公猪。

 

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1.3 抗体检测操作方法

 

本次检测试剂盒均为美国 IDEXX 公司生产,操作方法以及结果判定标准参照试剂盒说明书。

 

2 结果

 

2.1 猪瘟检测结果及分析

 

2.1.1 猪瘟 (CSF) 抗体检测结果 (阻断率≥40%为阳性)

 

猪瘟 (CSF) 抗体检测结果见图 1~4。

 

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2.1.2 猪瘟抗体分析

 

结合图 1~4 分析如下。

 

⑴种猪群

 

经产母猪、公猪的猪瘟抗体阳性率均为 100%,刚进入隔离舍的后母猪抗体阳性率为 80%,所有种猪群的抗体阳性率平均为 98.7%,符合农业部动物疾病强制免疫计划中种猪群抗体阳性率 90.0% 的合格率要求,同时种猪群猪瘟抗体的离散度较小 (4%~26%),说明种猪阶段猪瘟抗体的保护效果很好。从猪瘟的抗体阻断率分布范围可以看出,高胎次母猪和低胎龄母猪 (包括后备母猪、青年公猪) 抗体阻断率要低于3~5胎龄的母猪,这可能是由于低胎龄母猪免疫猪瘟的次数相对较少,故产生的猪瘟抗体水平较低。高胎次母猪抗体阻断率较低,可能由于随着使用年限的增加,免疫猪瘟疫苗的次数不断增加,导致机体对猪瘟疫苗产生了一定程度的免疫麻痹,同时高胎次母猪自身健康状况的恶化,使其对猪瘟疫苗的免疫应答有所下降。不同怀孕阶段及哺乳母猪的猪瘟抗体阻断率无明显差异。

 

⑵商品猪群

 

商品猪群猪瘟抗体的阳性率为 87.5%,符合我国农业部动物疾病强制免疫计划中商品猪群 70.0% 的合格率要求,同时商品猪群猪瘟抗体的离散度差异较小 (7%~38% ),3 周龄和 7 周龄仔猪抗体的阳性率分别为 80%和40%,同时 3、7 周龄仔猪猪瘟抗体阻断率均在 65%以下;10 周龄仔猪猪瘟抗体阳性率为 100%,但 80%猪只抗体阻断率小于 65%,10 周龄以后,猪瘟抗体阻断率逐渐增加。结合商品猪群猪瘟的免疫程序,即 4 周龄首免、8 周龄二免,在首免后猪瘟的抗体阻断率并没有明显增加,二免后猪瘟抗体阻断率逐渐增加,该猪场商品猪群猪瘟抗体阻断率的变化趋势属于正常现象。同时也提醒我们,猪瘟高效细胞苗只有二免以后才能产生较好的保护力,首免和二免的间隔时间不要超过 5 周。

 

2.2 PRRSV 检测结果及分析

 

2.2.1 PRRS 抗体检测结果 (≥0.4 为阳性)

 

PRRS 抗体检测结果见图 5~8。

 

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2.2.2 PRRS 抗体分析

 

IDEXX PRRSV 抗体检测试剂盒以蓝耳病病毒的核衣壳蛋白 (N 蛋白) 为包被抗原,N 蛋白不能诱导机体产生针对病毒的中和抗体,该试剂盒不适用于对疫苗免疫保护力的监测,但是能够在一定程度上判断猪只蓝耳病病毒的免疫或感染状态,且因其保守性好、敏感性高、结果重复性好,而被广泛应用。结合图 5~8 分析如下。

 

⑴种猪群

 

种猪群 PRRS 抗体阳性率为 77.3%,其中 7 胎及以上母猪抗体阳性率为 53.%,种猪群抗体值均小于 2.5,说明种猪群内 PRRSV 的感染压力很低。同时,青年公猪、后备母猪、低胎龄母猪的抗体值要明显大于高胎龄母猪。这种现象在 PRRSV 稳定、长期使用进口 PRRSV疫苗的猪场内经常可以见到,随着猪只免疫 PRRSV 疫苗的次数不断增加,PRRS 抗体值逐渐降低,但猪群的PRRSV 感染压力越来越小。在离散度方面,7 胎及以上胎次母猪的抗体离散度最高,但该阶段母猪的抗体值均低于 1.5。这提示我们在解读抗体离散度的时候,需要考虑到具体抗体值的大小;与高抗体值相比,在低抗体值水平下,相同的数值差异,会导致离散度明显增加。

 

⑵商品猪群

 

与 3 周龄相比,7 周龄仔猪抗体平均值、抗体阳性率均有所增加,10 周龄后出现下降的趋势,但 13 周龄后重新出现上升趋势。10 周龄以后抗体平均值均在 2.1 以内,商品猪群中只有 2 个样本的抗体值大于 2.5,分别是 7 周龄和 25 周龄的两个样本 (抗体值分别为 2.59 和2.72)。结合猪场的 PRRSV 免疫程序,仔猪 14 日龄免疫某进口 PRRSV 弱毒疫苗 (VR2332 毒株),说明 7 周龄抗体值增加是疫苗免疫后的正常反应,13 周龄时抗体值虽有所增加,但抗体值均在 2.0 左右,说明 10~13 周龄猪场内可能存在一定的野毒感染,但感染的压力很小。

 

2.3 PRV 检测结果及分析

 

2.3.1 猪伪狂犬病 (PRV) gE 抗体检测结果 (≤0.6 为阳性)

 

PRV-gE 抗体检测结果见图 9。

 

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2.3.2 猪伪狂犬病 (PRV) gB 抗体检测结果 (≤0.6 为阳性)

 

PRV-gB 抗体检测结果见图 10~13。

 

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2.3.3 PRV gE、gB 抗体分析

 

⑴gE 抗体检测显示该猪场为猪伪狂犬野毒阴性场。

 

⑵种猪群。gB 抗体检测结果显示,经产母猪群及已经结束隔离的后备母猪 gB 抗体阳性率为 100%,同时S/N 值均在 0.1 以下,说明该猪场后备母猪在配种之前经过两次免疫 PRV 疫苗、经产母猪多次免疫 PRV 疫苗以后可以产生很好的 gB 抗体。青年公猪、刚进入隔离舍的后备母猪 gB 抗体阳性率相对较差,可能与疫苗免疫次数相对较少有关。这提示我们只有经过多次免疫后,猪群才产生较好的 PRV 保护水平,同时也提示我们需要加强针对后备种猪群的生物安全,提高免疫频率。

 

⑶商品猪群。与 3 周龄相比,7 周龄仔猪的 gB 抗体水平明显降低,说明母源抗体的保护力在逐渐消失。10 周龄后 gB 抗体逐渐增加,说明 9 周龄 PRV 免疫已经产生作用。25 周龄时 gB 水平降到最低,说明伪狂犬疫苗的保护力在这阶段已经很弱,提示我们如果商品猪仅有70日龄左右一次免疫,肥猪群是猪场内 PRV野毒的突破口,猪场需要根据自身情况加强肥猪群的生物安全、增加商品猪群的免疫密度,提高 gB 抗体水平,防止野毒的感染。

 

3 讨论

 

通过对该猪场猪瘟、PRRS、伪狂犬相关抗体的系统分析,可以得出,猪瘟、蓝耳、伪狂犬这三种疾病在该场得到了很好的防控。同时根据抗体的变化曲线,我们也可以得到以下规律。

 

⑴后备种猪群由于疫苗免疫的密度较小,抗体水平通常会较差,在猪场中属于高风险群体。

 

⑵不同妊娠阶段、哺乳期母猪群在抗体水平上无明显差异。

 

⑶在解读抗体离散度的时候,需要考虑到具体抗体值的大小,与高抗体值相比,抗体值越低,相同的数值差异产生的离散度明显增加。

 

⑷商品猪群猪瘟需要免疫两次以后,方可得到较强的免疫保护,在制定猪瘟的免疫程序时,需要根据猪瘟的母源抗体水平确定合理的首免时间,在首免后的 5 周内进行 2 免。在没有 PRRSV 重复感染的 PRRSV 稳定猪场,如免疫进口 PRRSV 弱毒疫苗 (VR2332 毒株),种猪群随着免疫次数的增加,N 蛋白抗体的水平会逐渐下降。

 

⑸肥猪阶段是 PRV 的感染窗口,需要根据猪场的具体情况,调整商品猪群 PRV 的免疫程序,提高 gB 抗体的水平,并加强肥猪阶段的生物安全。

 

4 小结

 

在猪场疾病风险逐渐增大的时代,猪场更需要重视疫病的检查和监测。设计科学合理的、能够反映猪群实际状况的采血方案,采血后进行重大疫病抗体的检测并对结果进行科学的分析,以便及时发现并科学处理猪群中潜在的疫病风险,提高猪群的健康状况,将猪病尤其是重大疫病扼杀在“摇篮”之中,实现猪场的健康可持续发展。

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