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李曼养猪大会听课笔记 | 分会5-圆环病毒PCV

李曼养猪大会 2023-10-24

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2023年10月21日下午,第十二届李曼中国养猪大会《圆环病毒PCV》在西安国际会展中心204二楼隆重召开。本场会议的主持人为ArkCare的汤姆·佩茨尼克。

10月21日/下午

 

第十二届李曼中国养猪大会会前会于2023年10月20日开启,李曼大会秉承“为世界养猪业提供科学为本的解决方案-聚焦中国”的主旨,持续为中国养猪从业者分享来自全球权威专家的前沿科研成果,邀请了国内外100多位权威专家学者、资深从业者、知名企业家,越南、印尼等国际参会代表也将齐聚西安。

 

2023年10月21日下午,第十二届李曼中国养猪大会《圆环病毒PCV》在西安国际会展中心204二楼隆重召开。本场会议的主持人为ArkCare的汤姆·佩茨尼克。

 

汤姆·佩茨尼克

图 汤姆·佩茨尼克,ArkCare

 

会议日程如下:

 

圆环病毒PCV

 

主持人:汤姆·佩茨尼克

 

1:30am - 控制PCV2 和PCV3 的免疫策略,  汤姆·佩茨尼克,ArkCare

 

2:00am - 家庭农场猪圆环病毒II型感染减量化实践路径与效果评估,殷华平,富之源集团

 

2:30am - 我国猪圆环病毒的流行现状与临床诊断, 李向东,扬州大学

 

1 控制PCV2和PCV3的疫苗接种策略

 

汤姆·佩茨尼克,ArkCare

 

汤姆·佩茨尼克

图 汤姆·佩茨尼克,ArkCare

 

一、PCV2和PCV3对比

 

汤姆·佩茨尼克首先对PCV2和PCV3进行对比,二者都是多系统疾病,而PCV2的临床表现是消瘦,繁殖障碍和皮炎肾衰综合征,PCV3的临床表现主要是繁殖障碍,神经系统和生长发育不良。

 

二、圆环病毒的进化

 

汤姆·佩茨尼克根据在美国的研究发现,圆环病毒复制频次低,圆环病毒依赖于细胞增殖的发生才能进行高水平的复制,因此并发感染和疫苗刺激有利于猪的环状病毒的复制。

 

三、对疫苗接种战略的影响

 

汤姆·佩茨尼克提出在进行疫苗接种时,不仅要考虑圆环病毒接种,还要考虑猪的主要病毒和次要病毒,以防止并发感染;此外还要考虑一个出生仔猪对于病毒感染的区间,感染的最小量是多少,因为控制所有的并发感染是不行的,这两点是他在客户农场中采用疫苗接种策略的基础。

 

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PCV2a,PCV2b和PCV2d的毒株结构,不同的颜色代表不同的氨基酸,病毒是非常复杂的,其也是在进行不断地进化。

 

四、总结

 

汤姆·佩茨尼克提出PCV2和PCV3可引起猪的多系统疾病,圆环病毒的复制依赖于细胞发生或免疫激活,圆环病毒的进化是真实的。各个猪场的目标是控制并发感染,保持稳定的母猪群接种,以获得猪流接种的最佳效益,这样做将优化性能,减少PCV的复制和进化,但是需要进行监测和测序,一边根据需要调整疫苗接种战略。

 

2 家庭农场PCV2感染减量化实践路径与效果评估

 

殷华平博士,贵州富之源集团

 

殷华平

图 殷华平,贵州富之源集团

 

第二位分享的嘉宾是来自贵州富之源集团的殷华平博士,他从理论基础和实施方案以及效果评估这三个方面对此次内容进行分享。

 

一、理论基础

 

殷华平博士首先用“跷跷板”模型表示猪体内病毒载量与猪的健康程度的关系,体内病毒载量到达一定值后,猪只发病。当前生产上PCV2的防控方法有疫苗免疫、药物控制和没影响不处理这三种,但是这三种都是依据猪只的健康度为出发点的,很少有人在病毒的防控上做尝试,针对此其提出是否可以以病毒消杀来防控PCV2的思路。

 

二、实施方案

 

1.建立检测方案

 

建立检测实验室以及检测评估方案。

 

2.评估圆环消杀方法

 

殷华平博士以一个家庭农场为例,该农场在清栏结束后进行清洗消毒,采样检测圆环,发现PCV2 CT值24,表明PCV2病毒在环境中存活能力极强,常规消毒方法不易见效,针对此殷华平博士查阅文献发现(0.3%或3000μg/l)次氯酸钠能在批准使用浓度杀灭PCV2病毒。但是猪场的漂白粉浓度可能较低,是否能达到消毒的目的,因此其设计了试验方案:

 

• 病原原液:含CT值17的PCV2样品;

 

• 试验方法:喷洒在模拟猪舍的水泥地面上;

 

• 采样检测:1:1000漂白粉消毒-1、10、15、20分钟,分别采样检测PCV2;

 

• 试验结果:1:1000漂白粉(即:1kg/吨水)消毒10分钟以上可杀灭PCV2。

 

3.疫苗免疫;

 

除此以外,还要进行疫苗免疫,母猪:2次/年,进口杆状病毒表达灭活疫苗;仔猪:21日龄,1头份;后备:26周龄,1头份。

 

4.环境消杀及评估

 

• 种场消杀灭源

 

按照非瘟同等级别生物安全流程操作;2次/周环境消毒,猪舍用卫可,外环境用漂白粉;产房断奶清洗后用1kg漂白粉/吨水消毒环境过道等。

 

• 种场采样评估

 

每批仔猪脐带血采血评估PCV2的感染情况;每个月对环境采样进行评估PCV2的感染情况;每个季度采血评估PCV2的病毒血症感染情况。

 

• 家庭农场消杀灭源

 

投苗前1kg漂白粉/吨水冲洗消毒;每周对走道等公共区域消毒1次;投苗后每月1kg漂白粉/吨水带猪冲栏至少1次。

 

• 家庭农场采样评估

 

采样检测圆环阴性才能允许投苗;消瘦猪只采血/口腔液检测PCV2,CT

 

<20则淘;每个月对环境/口腔液采样检测评估圆环感染情况。

 

三、效果评估

 

1.检测结果-PCV2减量化前病原检测CT值极低,如下图所示:

 

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图 减量化之前病原检测

 

在通过减量化之后,病毒量降低,如下图:

 

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图 减量化之后病原检测

 

2.减量化后猪群不再出现PMWS临床症状;

 

3.减化量后生产成绩得到了显著提升。

 

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依据以上的案例,殷华平博士得出家庭农场PCV2减量化措施应该从种场做起,进苗前PCV2检测淘汰,途中加强检测和淘汰。基于以上措施会产生降低料肉比、死亡率,提高生长速度的效果。

 

3 我国猪圆环病毒的流行现状与诊断

 

李向东教授,扬州大学兽医学院

 

李向东

图 李向东教授,扬州大学兽医学院

 

第三位分享的嘉宾是来自扬州大学兽医学院的李向东教授,他先对圆环病毒做了简介,然后又分别对PVC2,PVC3和PVC4当前的流行现状以及诊断做了此次的分享。

 

一、圆环病毒简介

 

圆环病毒是目前已知的最小的病毒,属于圆环病毒科、圆环病毒属。可感染猪的圆环病毒包括PCV1、PCV2、PCV3、和新近出现的PCV4。圆环病毒基因相似,PCV1、PCV2、PCV4进化相似。

 

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图 猪圆环病毒的遗传进化

 

二、PVC2的流行与诊断

 

猪场感染 PCVAD 后,常见的症状包括消瘦、腹泻、呼吸困难、流产率、死胎和胎儿木乃伊化比例升高。不同的临床表现与其在体内的病毒载量有关,PCV2在育肥阶段感染率最高,断奶前仔猪和母猪最低。

 

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图 不同PCV2x的占比以及在PK15细胞上的分离结果

 

PCV2a、PCV2b、PCV2d是PCV2流行的主要基因型,并且PCV2x在细胞上的分离难度较大。

 

李向东教授还提出PCV2的检测方法有三种方法,分别是分子方法PCR和qPCR,免疫组化以及血清学,其中PCV1与PCV2存在血清学交叉反应,因此,使用间接ELISA方法检测PCV2抗体水平会受到PCV1抗体的干扰。

 

三、PCV3的流行与诊断

 

李向东教授首先对国内外PCV3的出现时间与猪只症状做了分享,PVC3于2016年首次在美国报道,与母猪丘疹性皮炎、肾病综合征和流产相关;华南农大在2016年流调首次发现PCV3,PVC3c是目前国内流行的主要毒株。

 

PVC由于PCV2/PCV3的流行,李向东团队建立了一种同时检测PCV2/PCV3 的双重荧光定量PCR方法,收集来自20个省份60个猪场730份临床样品用于PCV3检测,其中140份样品为PCV3阳性,对比发现南方九省PCV3的阳性率显著高于北方6省,而后对不同类型组织PCV3进行检测,检出率从高到低依次为肺脏、淋巴结、死胎、肾脏、脑、扁桃体、脾脏、心脏和肝脏。此外还发现PCV3/PCV2混合感染率为45.8%;PCV3/PRRSV混合感染率62.5% ; PCV3/PCV2/PRRSV混合感染率为33.3% 。

 

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李向东团队开展组织毒致病力研究,将PCV3单纯感染的组织碾磨,滴鼻,肌注感染猪,鼻腔和肌注接种,感染21天剖检,大体剖检可见PCV3感染猪的淋巴结出血,肾脏表面由散在的出血点,病理可见淋巴结淋巴组织逸失、出血,间质性肾炎。还通过对PCV3临床混合感染,发现PVC3能显著增强PCV2和PRRSV致病力。

 

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图 猪只病理切片

 

最后其团队用PCV3感染小鼠,发现小鼠在感染后3-7天出现病毒血症,小鼠的Cap蛋白抗体在感染后第3天转阳,抗体滴度不断上升。

 

四、PCV4的流行与诊断

 

2019年4月,我国首次于湖南省发现PCV4,PCV4 DNA可在临床中出现呼吸道症状、消化道症状和皮炎肾病综合征等发病猪中检测到。同时,在健康猪群中也可以检测到, 在脑、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、淋巴结和小肠中均可检测到,除猪以外,在犬、狐狸、水貂、貉和奶牛体内可检测到;

 

李向东教授团队应用建立的PCV1-4 四重实时荧光检测方法检测2016-2020年采自江苏省120份临床样品,PCV4阳性有4份,又用血清流行病学调查,结果表明,PCV4血清阳性率为1.51 %。

 

李向东教授团队将PCV4在PK-15细胞中被提取出来,并运用动物感染实验证实PCV4可引起不同脏器的病变。

 

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李向东最后提出要持续关注PCV4的未来动态。


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