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听课笔记
01 蓝耳病的免疫策略
一、我国PRRSV流行情况
路伟博士首先分享了我国部分地区PRRSV各个毒株的检出比例变化趋势。2016年以来，NADC30-like和NADC34-like呈逐年上升趋势，已成为我国主要的流行毒株，以NADC30-like为主，NADC34-like和HP-PRRSV 次之，欧洲株也有部分地区检出。目前猪场中呈现多毒株同时流行的情况，造成部分猪场临床症状加重，主要表现为母猪持续性流产、屡配不孕，断奶仔猪呼吸道综合征，NADC-30/ 34如和其他毒株重组，会表现高致病毒力毒株的特点，猪场实际生产成绩与经济效益深受影响。
二、蓝耳防控的主要方向
路博士列出了当前蓝耳病防控的三个主要方向：
1、外防感染：对于蓝耳病毒，非瘟防控的生物安全措施已经效果很好，外引种猪成为蓝耳病毒进场的最大威胁因素，引种时蓝耳监测和引种后的驯化成为猪场蓝耳病毒外防感染的焦点；蓝耳防控的方法很多，作为病毒病，疫苗免疫是简单经济有效的方式。
2、内切循环：养猪饲养模式及转群方式的不同，决定了蓝耳病毒在猪场内的传播方式及传播时长不同，如自繁自养一点式及或不能完全全进全出的仔猪育肥模式，病毒在场内同一猪群或不同猪群之间会不断的循环感染；而两点式饲养或能真正实现全进全出的仔猪育肥模式则能够有效避免或减少蓝耳病毒的循环感染。
3、检测应用：适当日龄段的连续性抗体监测或病原检测，能直观看出抗体和抗原变化，以抗体的阳性率、S/P值、离散度的变化，综合分析变化趋势，及时调整免疫措施及其他措施，结合临床和生产状态评估猪场感染压力及防控效果。
三、疫苗免疫的必要性
目前针对主要流行的类NADC30/34没有商品化疫苗，蓝耳病的防控特别是免疫策略需要进行针对性的分析。因此，自繁自养一点式的猪场、频繁引种或引种后导致不稳定，出现母猪繁殖障碍和断奶后的蓝耳早期感染，蓝耳循环感染压力大，使用安全有效的活疫苗（MLV），对疫病防控有积极作用，对呼吸道疾病的控制、生产成绩的提高，对迅速稳定蓝耳病（紧急免疫）及用药效果有帮助。
当前市场上疫苗种类和厂家很多，各个猪场的生物安全执行情况、生产模式也不相同，蓝耳病毒流行情况复杂，怎样选择疫苗成为大多数猪场最大的困惑。
疫苗的评估标准，首先是疫苗使用后是否安全，免疫副反应及对临床和生产指标的影响大不大；其次，疫苗免疫后（提前免疫或紧急免疫）的效果，临床和生产指标是否稳定（趋稳），是否能抵挡野毒攻击（最能直接体现效果）；再者，疫苗产品的稳定性（效价、外援污染、批间指标的均一稳定）也是猪场选择疫苗产品的衡量标准。
灭活疫苗的免疫攻毒研究课题不多，广东农科院研究团队的实验结果表明，灭活疫苗免疫后的保护效果有限，对低毒力毒株攻毒有一定保护，对中等毒力毒株的攻毒交叉保护不明显，对强毒株攻毒无保护，且在攻毒后出现典型的ADE效应（抗体依赖性增强）。
不同蓝耳毒株的生产厂家2022年批签发数量变化可以看出，市场的选择以活疫苗为主，减毒活疫苗免疫攻毒实验的研究也比较多。
实验数据分析表明，商品化MLV (VR2332/TJM-F92) 对感染类NADC30 PRRSV(不同致病力)和HPPRRSV的仔猪提供保护或提供部分保护，可以缩短感染猪只发烧时间，改善临床症状、改善日增重、减少肺脏的病理损伤、显著降低病毒血症等；对HP-PRRS和不同致病力的类NADC30 PRRSV的感染，TJM-F92的交叉保护效果明显，特别是在发热时间、临床症状、日增重和肺脏损伤方面有明显的改善，改善程度优于其他活疫苗毒株。
2023年5月，扬州大学商绍斌老师团队对TJM-F92免疫后对NADC3-like的保护机制做了最新研究。结果显示，攻毒后，TJM-F92免疫猪的发热和临床症状出现的猪只更少 (2/5) 、肺部病变更轻微、病毒载量也更低，TJM-F92疫苗能够针对NADC30-like PRRSV的感染提供交叉保护；
体液免疫应答检测结果表明，攻毒后14天可以检测到N蛋白抗体，但无法检测到针对NADC30的病毒中和抗体，表明TJM-F92疫苗提供的保护是可以不依赖病毒中和抗体的；
细胞免疫应答检测结果表明: TJM-F92疫苗诱导了以CD8 T细胞为主的特异性细胞免疫应答，这些活化的CD8 T细胞对异源NADC30样PRRSV的攻击具有记忆应答。
TJM-92株相比传统高致病毒株NSP2基因缺失120aa（360个核苷酸），毒力减弱，同时消除了免疫抑制对其他疫苗效果的影响，国际上使用反向遗传技术构建了猪繁殖与呼吸综合征基因缺失疫苗 (P129株)，在Nsp2基因缺失393个核苷酸，缺失后病毒毒力消失，缺失的片段与TJM-92株大部分重叠。
蓝耳活疫苗（TJM-F92株代表——华蓝康）免疫方案：
注：免疫时间确定的原则，蓝耳活跃期（蓝耳不稳定）之前2~3周左右免疫，紧急免疫控制在发病早期（7天以内最佳）。
最后，路博士指出灭活疫苗、经典株疫苗和高致病性毒株疫苗都有不同的应用场景，猪场或猪群要根据蓝耳防控目标、饲养管理模式、感染压力情况不同选择适合的疫苗。
02 猪流感的免疫策略
关于猪流感在猪场的免疫策略分享，路博士从猪流感的简介、发病特点及危害进行了讲解。通过农业农村部5-8月通报的全国主要动物疫病里猪流感的发病率较高（报告中仅次于腹泻），该病发病急、潜伏期短、传播快，呈暴发时群发的特点，死亡率主要取决于是否有继发感染。猪流感在我国流行主要以H1N1亚型为主，H3N2亚型为辅。猪流感在育肥猪群暴发一次损失约70-80元/头，英国肉业每年大约损失6500万英镑，故猪流感的防控关乎猪场降本增效。
通过华威特生物检测中心近年来猪流感流行病学调查和病毒分离研究结果来看，2022年10省18个猪场的H1N1亚型毒株的流行以毒株1和毒株2为主，与2020年（毒株4）和2021年（毒株3）H1N1亚型毒株的抗原亲缘性越来越远，说明毒株有变异。2020年-2023年，华威特检测中心分离猪流感流行毒株H1N1亚型和H3N2亚型数量分别为26株和2株，猪场主要感染毒株为H1N1亚型，攻毒试验表明，2021年后猪流感病毒呈现毒力增强的特点。
猪流感的防控生物安全效果不佳，主要是从管理保健和疫苗免疫方面来做，疫苗免疫最简单和最经济，效果最佳，疫苗免疫要注意流行毒株和抗体监测。2021年后，国内猪流感疫苗产品如雨后春笋般增加，目前生产厂家有4家，未来还会有6家上市产品，这足以说明市场对猪流感及其疫苗的关注度逐年上升。华威特生物自主研发的猪流感二价灭活疫苗（华感健）2022年批签发占比60%以上，产品自上市后得到了广大猪场和养殖集团的使用和认可。
疫苗免疫方案路博士建议一定要进行前置性免疫，即在猪流感高发季来临前免疫，首免后间隔2-3周务必加强免疫1次，具体免疫方案见下图。猪流感疫苗免疫效果主要从四方面评估：安全性、有效性、临床生产情况和效益。疫苗免疫后采血检测，HI抗体效价≥1:160判断为有保护。
（供稿人：技术服务部 孔令青）
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