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2022年5月10日，国际期刊（Vaccines）在线发表中国农业科学院哈尔滨兽医研究所猪病综合防控创新团队和猪蓝耳病与伪狂犬病研究创新团队关于L1分支PRRSV减毒候选疫苗株对我国不同类NADC30 PRRSV交叉保护效果的研究论文，该论文首次报道了L1分支PRRSV候选疫苗株的安全性和有效性，为我国类NADC30 PRRSV的防控提供了新的策略。相关论文“Lineage 1 porcine reproductive and respiratory syndrome virusattenuated live vaccine provides broad cross-protection against homologous andheterologous NADC30-like virus challenge in piglets”链接如下：https://www.mdpi.com/2076-393X/10/5/752。
至今我国PRRSV的流行主要经历了3个重要阶段，第一阶段是以PRRSV CH-1a株为代表的经典毒株流行阶段，第二阶段是以JXA1、HuN4、TJ株为代表的HP-PRRSV流行阶段，第三阶段是以类NADC30 PRRSV为主的流行阶段。中国农科院哈尔滨兽医研究所PRRSV监测数据发现，2016年至今，以类NADC30 PRRSV为主的L1分支PRRSV成为了我国的主要流行毒株（图1），同时类NADC30 毒株为主的L1分支PRRSV也是目前北美和亚洲主要养猪国家的PRRSV优势流行毒株。国内多家猪蓝耳病研究团队报道了当前的商品化PRRS疫苗针对类NADC30 PRRSV不能提供或仅提供部分保护，我国当前应用的PRRS疫苗主要包括L8分支活疫苗（CH-1R、JXA1-P80、HuN4-F112、TJM-F92、GDr180和PC）和L5分支活疫苗（RespPRRS MLV/Ingelvac PRRS® MLV）以及L8分支灭活疫苗（CH-1a株），这些疫苗的应用对我国PRRS的防控发挥了重要作用，但目前世界范围内尚没有针对L1分支PRRSV的有效的疫苗，为此该团队开展了本研究。
图1 2014-2021年不同类型PRRSV在我国的流行状况
研究人员在测定了大量的类NADC30 PRRSV全基因组序列基础上，分析发现NSP9和GP2-3是我国类NADC30 PRRSV的重组热点区域，随后筛选出以类NADC30序列为主要骨架在两处重组热点发生小片段重组且致病力较为温和的类NADC30 PRRSV SD株进行传代致弱，获得了在Marc-145细胞上稳定传代的细胞毒（SD-R株，F125代）。与母本毒株相比，SD-R株疫苗候选株共产生31个氨基酸的稳定突变和非翻译区4个核苷酸的稳定突变。SD-R株10倍免疫剂量接种仔猪，14天内接种猪不出现发烧、厌食、咳嗽等临床症状，仅个别猪短时间内检测到低水平的病毒血症。
由于不同类NADC30 PRRSV间全基因组同源性低，重组模式比较复杂，该研究选择类NADC30 PRRSV HLJWK108-1711株（重组模式复杂，与SD株的全基因组核苷酸同源性为89.9% 图2）用于交叉保护效果评价。
图2本研究用于攻毒评价的类NADC30 PRRSV SD株和HLJWK108-1711株的比较
SD-R候选疫苗株免疫4周龄健康仔猪，免疫后14天，免疫组所有猪只PRRSV N蛋白抗体均转阳，免疫过程中各组日增重差异均不显著。免疫28天后，用类NADC30 PRRSV SD株和HLJWK108-1711株进行攻击，结果显示，SD株和HLJWK108-1711株对照攻毒组均出现不同程度的发烧、食欲减退（日增重降低）、咳嗽等临床症状，而免疫攻毒组没有异常临床症状（图3）。
图3 类NADC30 PRRSV SD株和HLJWK108-1711株攻毒后各组体温与增重变化
SD-R候选疫苗接种后免疫猪均没有检测到病毒血症，攻毒后，免疫组与攻毒对照组相比显著降低了血液中的病毒载量，同时可以显著降低组织中的病毒载量（图4）。
图4 类NADC30 PRRSV SD株和HLJWK108-1711株攻毒后各组病毒血症和组织病毒载量变化
剖检发现，攻毒对照组肺脏呈现典型的片状实变，淋巴结出血等病理变化，免疫攻毒组没有明显的病理变化（图5）。
图5 类NADC30 PRRSV SD株和HLJWK108-1711株攻毒后各组病理变化及组织病理学变化
猪病综合防控创新团队首席科学家田志军研究员指出，该研究中获得的疫苗候选株SD-R株不仅对不同类NADC30 PRRSV表现出良好的交叉保护效果，SD-R株对HP-PRRSV也表现出良好的临床保护效果。该研究丰富了我国对PRRSV的防控手段。
本研究是在中国农科院创新工程；国家自然科学基金（32172890和32002315）；中国博士后科学基金（2020M680788）资助下完成的。张洪亮博士后、相丽润硕士和许浒博士为本文共同第一作者，田志军研究员为通讯作者。汤艳东副研究员等为本研究及文章发表做出了重要贡献。（张洪亮）
