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哺乳仔猪伪狂犬病毒感染导致的异常眼部表现

猪相关 2022-05-20

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中国东部地区的一个大型商业猪场(>2000头母猪),报告了几窝哺乳仔猪出现眼睛不透明和失明的异常情况。母猪正常吃料和哺乳。死胎和弱仔的数量略高于正常水平,断奶前死亡率上升。

中国东部地区的一个大型商业猪场(>2000头母猪),报告了几窝哺乳仔猪出现眼睛不透明和失明的异常情况。母猪正常吃料和哺乳。死胎和弱仔的数量略高于正常水平,断奶前死亡率上升。有几窝猪每窝都可以观察到几头失明、角膜混浊和眼部肿胀的仔猪。(图1)。

 

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图1:角膜混浊的猪

 

患病猪表现沉郁、嗜睡、无法哺乳。据说流产率有所提高,但没有发生全面的流产风暴。木乃伊猪的数量在正常参数范围之内。除此之外没有报告其他临床症状。通过对配种记录的快速检查,排除品种原因,因为不同品系的猪都有受到影响。

 

需要开展的鉴别诊断包括猪胸腺病毒(蓝眼病)和眼部细菌感染。蓝眼病由副粘病毒引起,据说在墨西哥部分地区流行。它会导致中枢神经系统疾病、肺炎和种猪的繁殖问题,包括公猪的睾丸炎和角膜病变,但在中国或墨西哥以外的任何地方都没有发现。蓝眼病的初步诊断需要通过观察异常的临床症状并通过PCR检测和病毒分离来确认。

 

维生素A的缺乏也可以导致严重的眼部病变,但在这种大型商业猪群中不太可能出现这种情况。

 

诊断

 

猪场员工对其中一只患病猪进行了人道处死并进行了解剖。组织(肝脏、淋巴结、大脑)的新鲜和福尔马林固定的样本,以及图1中猪的新鲜眼睛被提交给了实验室。

 

除了眼部病变,猪场员工没有发现其他宏观病变。从眼睛吸出的眶内液看起来清澈,看不到有什么不寻常之处。

 

姬姆萨染色的眼液涂片可以看到少量单核细胞和一些杆状细菌。从眼液中分离出一些比较不意外的大肠杆菌。排除了是细菌感染的可能性。福尔马林固定的淋巴结、大脑和肝脏用快速石蜡法处理进行组织切片并进行H&E染色。

 

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图2:血管套及胶质增生。大脑。

 

对大脑的显微镜检查显示有脑膜炎并伴有血管套和胶质增生(图2),以及脑膜浸润伴有混合的单核和多形核炎性细胞(图3)。

 

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图3:脑膜炎伴单核细胞和少数多形核细胞。大脑。

 

肝脏有局灶性坏死,坏死区域周围组织出现双嗜性核内包涵体(图4)。于是提出伪狂犬病(PRV,Aujeszky病)的推定性诊断。

 

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图4:局灶性肝坏死,坏死周围偶尔有双嗜性核内包涵体。肝。

 

对眼睛玻璃体液的PCR扩增获得了编码gE蛋白(glycoprotein E)蛋白的猪阿尔法疱疹病毒1(伪狂犬病毒)的US8(“unique-short” 8)基因片段,证实存在野生型伪狂犬病病毒。对US8扩增片段的测序显示,检测到的病毒与当前在中国很常见的一种2型伪狂犬病新变种在一个聚类中。

 

该猪群已知对PRV gE抗体呈血清阳性。之前感染的母猪会长期对PRV gE呈血清阳性,并将抗gE抗体传递给仔猪,使其在15周龄内对PRV呈血清阳性。因此对幼龄猪进行抗体检测的意义不大,因为大多数母猪都是阳性。在不清楚牧原gE抗体的持续时间的情况下,很容易做出假阳性的诊断。

 

结果

 

该猪场表示,PRV阳性后备已经进入繁殖群。为了防控非洲猪瘟,阻碍了正常的免疫计划。伪狂犬免疫接种计划中的错误随后得到解决,这个农场之后再也没有报告类似病例。

 

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图5:PhyML的系统发育树,PRV gE,途中显示有1型(kaplan/becker-like)毒株、“经典”2型(Fa/SC/Ea-like)毒株和增强毒力2型(TJ/hb1201样)毒株。最近的这个PRV,本例[20-1048]和人类脑炎PRV hSD1-2019,与TJ/hb1201同属一个聚类。

 

讨论

 

伪狂犬病(PRV)也被叫做奥杰斯基病"Aujeszky's Disease"(AD),在1813年被报道为牛的一种致命神经疾病,经常会被误认为牛和狗的狂犬病。由于瘙觉回路中的神经损伤,会产生强烈的不可抑制的瘙痒,这种情况被称为“疯狂瘙痒”,但有时也被称为“传染性球麻痹”。在20世纪30年代,R. E. Shope报告,欧洲的伪狂犬病和美国的疯狂瘙痒病其实是一种病,并且在大多数养猪国的猪群中广泛地地方性流行。

 

猪是PRV病毒的天然宿主。伪狂犬病感染可能是轻微的,几乎不明显,也可能导致高死亡率的快速爆发。观察到的PRV的毒力差异主要是受到毒株类型、动物因素以及一些随机因素的影响。

 

PRV在种猪中表现的主要症状是呼吸道疾病和以流产、胚胎死亡、难产、产木乃伊、弱仔、不孕等为主要症状的病毒性繁殖综合征。

 

猪眼睛感染PRV此前从未有报道

 

小于6周龄的仔猪可能会出现神经症状、颤抖、共济失调、抽搐、腹泻、呼吸窘迫和高死亡率。在哺乳期感染的仔猪通常在扁桃体、肝脏,有时是脾脏上有白色坏死灶。年长的猪通常会出现呼吸症状;咳嗽、呼吸困难和广泛性猪呼吸综合征,当并发有支原体感染、App、Strep、CSF、胃溃疡和通风故障等问题时。中枢神经系统(CNS)症状偶尔会出现在感染PRV的生长猪中,但在育龄猪中很少出现。肾脏上可能会看到出血。PCV2、猪瘟(CSF)、非洲猪瘟(ASF)和PRRS应该包括在鉴别诊断中,也可能发生混合感染。

 

PRV通过持续感染的母猪垂直传播,或通过污染的物品、肮脏的卡车和设施以及感染的动物进行传播。受感染的生长猪很容易通过呼吸道向空气中散播PRV。在凉爽潮湿的空气中,气溶胶可能会传播数公里。

 

PRV可以在猪以外的动物中观察到,特别是牛、羊、貂、狗和猫。雏鸡也易感。在PRV感染的猪场中观察到有抗性的农场犬,但一般情况下狗是易感的,在出现中枢神经系统症状后,最终会死掉。

 

伪狂犬病应不应该被视为人兽共患?

 

人类对该病毒有相对较强的抵抗力。尽管病毒确实可以在培养的人类细胞中复制,但人类感染极其罕见。据报道,有人在接触了猫和狗后发生感染,并有轻微的临床症状,但是最终康复和血清转化。最近,中国的养猪人、兽医和屠宰场工人中记录了几例严重的脑炎和眼内炎病例。这些严重的人类感染中通常都伴有受伤或严重创伤。在最近的人类感染PRV病例中检测到的病毒与本例中检测到的病毒的聚类关系密切(图5)。

 

是否有好的有效的疫苗?

 

接种疫苗可以有效降低PRV的发病严重程度和传播。目前的技术可以实现PRV的净化,但它在中国大多数主要生猪养殖省份流行,在猪密度高的地区,猪群流行率接近60%。中国猪场可以使用灭活(KV)和改性活疫苗(MLV),大多数猪群确实接种伪狂犬病疫苗。世界范围内使用的大多数PRV疫苗都有gE基因缺失,以使MLV疫苗无毒性,并实现DIVA(区分受感染和接种的动物)能力。第一批gE被删除的疫苗是Bartha small-plaque (K)无毒活疫苗(1961年)和被称为“Norden”的Bucharest(Buk)疫苗。gE完全或部分缺失的PRV疫苗正在使用中。在使用DIVA策略和配合全进/全出批次化生产的卫生/隔离措施的情况下,疫苗是净化和消灭PRV的有用工具。伪狂犬病疫苗不会诱导无菌免疫,也不会在猪周围产生能够保护猪在变幻莫测的田间条件下免受感染“神奇泡沫”。然而,重复接种PRV疫苗的母猪可以预见会产生被动体液免疫,保护猪免受感染,直到断奶后。反复接种疫苗的母猪不太可能将PRV病毒传播给仔猪或引入的先天阴性或准先阴后备猪。灭活苗在加强免疫方面比弱毒苗更有效,但经验表明,在KV疫苗不可用的情况下,MLV作为加强剂也“足够好”。如果接种疫苗的母猪产下的后备猪被接种疫苗并分批饲养,那么它们进入接种疫苗的母猪群后,可能会保持阴性,并通过减员取代老的感染母猪。就是用了这种方法,很多猪群、地区或整个国家完成了对这个病毒的净化。

 

增强毒力伪狂犬病

 

自2011年左右以来,中国报告了伪狂犬病的“增强毒力”(EV)变体。“西方”PRV毒株如Kaplan、Becker和Bartha属于1型(图5)。请注意,Bartha K-61具有完全缺失的gE。“经典”中国/亚洲PRV{Ea、Fa、SC}为2型。变体2型菌株{TJ、hb1201、jsy7-2021、...}与最近的“增强毒力”伪狂犬病暴发有关(病理学比经典2型更严重)。来自人类脑炎/眼炎的PRV,例如GenBank:MT469550(hSD1-2019)与在此异常病例中检测到的20-1048病毒以及EV菌株聚类在一起。(图5)。其中一些毒力增强可能是由于Bartha型缺失疫苗不刺激免疫而导致的gE糖蛋白的变化,或者是由于其他位点的变化。

 

净化PRV是可能和可行的,对可持续性、粮食安全和人类健康具有重要影响,并可以消除养猪场的一个重要损失来源。

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